ГОСТ Р ИСО 11133-2—2008
3)вслучав разбавителей итранспортных среднетребуется нипониженное, ни повышенное коли
чество целевых и/или нецелевых микроорганизмов. Число микроорганизмов после инкубации вданных
средахдолжно быть в пределах± 50 % от исходного количества.
П р и м е ч а н и е — Качество жидкой среды в плана свойств оптимального роста проявляется наиболее об
стоятельно на ранней стадии роста. Анализ продолжительности лог-фазы и роста а начале лог-фазы дает наиболее
точную информацию относительно производительности и селективности целевых и нецелевых микроорганизмов
соответственно в испытуемом и эталонном бульонах. Таким образом, если пытаются обнаружить только минималь
ные различия в качестве сред, следует провести штриховой посев из жидких сред в чашках после сокращенного пе
риода инкубации продолжительностью, например 6 или 12 ч.
5.4.3 Полуколичествонный метод с одной пробиркой для целевых, нецелевых и
смешанных микроорганизмов
5.4.3.1 Процедура
Отбирают нужное количество пробирок или порций по 10 мл каждой испытуемой партии.
Инокуляция целевых и нецелевых микроорганизмов как смешанной культуры: инокулируют одну
пробирку испытуемого бульона примерноот 10 до 100 КОЕ целевых микроорганизмов ивтуже пробирку
инокулируют повышенное число нецелевых микроорганизмов (> 1000 КОЕ на каждую пробирку) и пере
мешивают.
Инокуляция нецелевых микроорганизмов: инокулируют одну пробирку испытуемого бульона мик
роорганизмами с повышенным содержанием (> 1000 КОЕ) иперемешивают.
Соблюдают время итемпературу инкубации, установленные встандартных методах.
Отбирают 10мкл смешанной культуры ипроводят штриховой посев вчашкес конкретнойселектив
ной средой для целевых микроорганизмов.
Отбираютодну петлю (10 мкл) культуры нецелевых микроорганизмов ипроводят штриховой посев
вчашке с неселективной средой (например с триптиказо-соевым агаром).
Инкубируют обечашки внадлежащихусловиях необходимое время, как это установлено всоответ
ствующих стандартах.
5.4.3.2 Расчеты иинтерпретация результатов
Производительность испытуемого жидкого бульона является удовлетворительной, если по мень
шей мере 10 колоний целевых микроорганизмов выросли вчашке с селективным агаром.
Селективность испытуемого жидкого бульона является удовлетворительной, если не наблюда
лось никакого роста (или менее 10 КОЕ) нецелевых микроорганизмов вчашке с неселективиым агаром.
5.4.4 Качественный метод с одной пробиркой
5.4.4.1 Общие положения
Данный метод пригоден для эксплуатационных испытаний жидких культуральных сред. Метод
является только качественным, и оценки, таким образом, приблизительные. Для испытания мутных
сред, например тетратионатный бульон, этот метод не применим.
5.4.4.2 Процедура
Для эксплуатационных испытаний жидких культуральных средрабочиекультуры непосредственно
инокулируют виспытуемую среду, используя петлю на 1мкл.
Соблюдают время итемпературу инкубации, установленные встандартных методах.
5.4.4.3 Интерпретация результатов
Качественное определение следует проводить визуально путем определения баллов роста,
например, от 0 до 2.
Для пробирок ибутылок
- 0 соответствует нулевой мутности;
-1 соответствует очень слабой мутности:
- 2 соответствует удовлетворительной мутности.
Число балловдля целевых микроорганизмов должно быть равно 2.
П р и м е ч а н и я
1 Иногда рост микроорганизмов можно наблюдать только как агрегацию, осаждение клеток на дне пробирки
или бутылки. В этом случае оценивание и интерпретацию может улучшить тщательное встряхивание.
2 Данный метод позволяет также оценить другие характеристики, такие как образование газа, изменение
цвета и т.п.
8