ГОСТ Р 53139—2008
Рабочий раствор МТТ годен для применения в течение 1мес при условии хранения при температу
ре 4 °С (без доступа света!). Перед использованием необходимо контролировать pH и температуру ра
бочего раствора МТТ. значения которых должны составлять соответственно 3,6 и 20 °С—25 °С.
Контроль температуры осуществляют термометром. При отклонении от требуемого значения pH рабо
чий раствор МТТ готовят заново.
6.2.3 Рабочий раствор ФМС массовой концентрации 0.6 мг/см3
Растворяют 30 мг ФМС в 50 см3дистиллированной воды, полученной непосредственно перед при
готовлением раствора реактива и нагретой на электроплиткедо 40 °С—50 °С. Рабочий раствор ФМС го
ден для применения в течение 12 мес при условии хранения при температуре 4 °С. Незначительно
красное окрашивание, которое может появиться при хранении рабочего раствора ФМС. не влияет на ре
зультаты ферментативного определения аскорбиновой кислоты.
6.2.4 Рабочий раствор АО (1700 U/см3)’»
Навеску сухого лиофилизата. соответствующую активности фермента 1700 U. растворяют о
1.0 см3 фосфатно-цитратного буферного раствора с pH 3.6 (см. 6.2.1). Раствор готовят непосредственно
перед использованием.
6.2.5 Раствор гидроокиси калия молярной концентрации с (КОН) = 10 моль/дм3
Растворяют 14,03 г гидроокиси калия в мерной колбе вместимостью 250 см3 в 150 см3дистиллиро
ванной воды, полученной непосредственно перед приготовлением раствора реактива. После полного
растворения реактива объем раствора в колбе доводят до метки.
6.2.6 Раствор формалина с объомной долей 5 %
В химический стакан на 20 см3вносят 3 см3раствора формалина с объемной долей формальдеги
да 35 %. Добавляют 4 см3дистиллированной воды. Раствор перемешивают стеклянной палочкой и ис
пользуют для подготовки пробы согласно 6.3.3.
6.2.7 Раствор метафосфорной кислоты массовой концентрации (НР04)п= 15 г/дм3
Растворяют 15 г метафосфорной кислоты массовой долей 33.5 % в мерной колбе вместимостью
1000 см3в 500 см3дистиллированной воды, полученной непосредственно перед приготовлением рас
твора реактива. После полного растворения реактива объем раствора в колбе доводят до метки.
6.3 Подготовка пробы
Концентрированные соки и пюре перед определением восстанавливают согласно нормативным
документам свежейдистиллированной водойдо содержания растворимых сухих веществ согласно нор
мативным документам для соответствующего вида продукции.
6.3.1 Прозрачные или мутные слабоокрашенные пробы
С помощью раствора гидроокиси калия (10 моль/дм3) проводят корректировку pH пробы до значе
ния 3.5—4.0. В зависимости от количества аскорбиновой кислоты пробу разбавляют дистиллированной
водой или раствором метафосфорной кислоты (15 г/дм3) согласно таблице 1.
Т а б л и ц а 1
Массовая концентрация аскорбиновой
кислоты я пробе’1. г/дыэ
Разбавление
Фактор разбавления F
< 0.20
0,20—2.0
2.0-20.0
> 20
_
1 ♦ 9
1 ♦ 99
1 + 999
1
10
100
ю оо
" Для оценки количества аскорбиновой кислоты используют документы, содержащие сведения о составе со
ков и соковой продукции 15].
Пробу, содержащую мутную взвесь, после разбавления фильтруют через бумажный складчатый
фильтр. Для определения аскорбиновой кислоты используют визуально прозрачный слабоокрашенный
фильтрат в количестве 0,100 см3.
Допускается использовать а определении готовые препараты аскорбатоксидазы. Аскорбатоксидаза, им
мобилизованная на пластиковом шпателе на целлюлозной подложке (рабочая активностью фермента 17 U). вхо дит
в состав готового набора реактивов для определения аскорбиновой кислоты производства «Roche
Diagnostics/R-Biopharm AG» (номер набора 10 409 677 035). Пример схемы ферментативного определения с ис
пользованием готового набора реактивов приведен в таблице 3. Указанный набор реактивов является рекомендуе
мым для применения. Эта информация дана для сведения пользователей настоящего стандарта и не означает, что
стандарт устанавливает обязательное применение этого набора реактивов.
4