ГОСТ Р 53139—2008
Приложение А
(справочное)
Информация о медленно текущих реакциях
Ферментативные реакции в большинстве случаев являются реакциями нулевого порядка. Основная реакция
характеризуется высокой скоростью. Для побочной — медленно текущей реакции — характерны низкие скорости. С
практической точки зрения начало основной реакции связано с началом побочной реакции нулевого порядка. Ха
рактерным признаком медленно текущей реакции является постоянное количественное изменение оптической
плотности с течением времени. Для получения достоверных результатов значение имеет только основная реакция.
Концентрацию искомого вещества (субстрата в основной реакции) рассчитывают на основе количественной разни цы
между значением оптической плотности суммарной реакции (основная * медленно текущая реакции) и значени ем
оптической плотности медленно текущей реакции.
Медленно текущая реакция начинается в отправной точке суммарной реакции (рисунок А.1). В этот момент
времени в инкубационной смеси отсутствуют продукты ферментативной реакции, в том числе продукты медленно
текущей реакции, которые могли бы привести к изменению оптической плотности системы. Для количественного
определения общей разницы оптических плотностей значение конечной оптической плотности инкубационной сме
си экстраполируют на момент начала основной реакции — внесение фермента или добавление рабочего реактива
(рабочего раствора ФМС в ферментативном определении аскорбиновой кислоты). Контроль медленно текущей ре
акции позволяет получить только один количественный результат — значение оптической плотности в начальной
точке суммарной реакции (основная ♦ побочная реакции). Присутствие в инкубационной смеси медленно текущей
реакции регистрируют с момента завершения основной реакции.
амм*
ОСнйнЬ-*
млпило
тмущя рвидж
(i, У
dm i
пдоб—пшлпфчшлпж(нтапо*
оспяной р ш т )
Сумифмн решаю*-основная +ивдгютотаущ*я рвяпри
Рисунок А.1 — Графическое определение конечной оптической плотности инкубационной смеси,
в которой присутствует медленно текущая реакция
11