ГОСТ 29148-97
5.8Фотометрический метод определения массовой доли кофеина
Метод основан на гидролитическом окислении кофеина в тетраметилпурпуровую кислоту
(ТМПК) и последующем фотометрическом измерении интенсивности окраски ее раствора. Метод
применим при содержании кофеина в растворе от 10 до 30 мкг/см3.
5.8.1 Средства анализа и вспомогательные устройства
Колориметр фотоэлектрический КФК-2 УХЛ или другой марки с аналогичными метрологи
ческими характеристиками.
Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания
500 г 2-го класса точности.
Термометр жидкостный стеклянный диапазоном измерения от 0 до 100 °С с ценой деления
шкалы не более 1 °С по ГОСТ 28498.
Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.
Баня водяная лабораторная.
Часы песочные на 1 мин или секундомер механический.
Цилиндры 1(2)-10(250) по ГОСТ 1770.
Стаканы В(Н)-1(2)-150 ТС по ГОСТ 25336.
Чашки выпарительные типа 1 вместимостью 25 см3по ГОСТ 9147.
Воронки В-36-80 ХС по ГОСТ 25336.
Воронки ВД-1(2)-25-ХС по ГОСТ 25336.
Колбы мерные 1(2)-25(250, 1000) - 2 по ГОСТ 1770.
Пипетки 1-2-0,5, 1(4)-2-1(2) по ГОСТ 29169.
Кислота соляная по ГОСТ 3118, х. ч., плотностью 1190 кг/м3, раствор молярной концентра
ции с (НС1) = 3 моль/дм3 (248 см3 соляной кислоты плотностью 1190 кг/м3 помещают в мерную
колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем до метки и перемешивают).
Водорода перекись по ГОСТ 10929, х. ч., раствор массовой концентрации 150 г/дм3, получают
разведением исходного раствора (300 г/дм3) в соотношении 1:1. Перед использованием необходи
мо проверить исходную концентрацию перекиси водорода по ГОСТ 10929.
Хлороформ по ГОСТ 20015, х. ч.
Калия гидроокись по ГОСТ 24363, раствор массовой концентрации 150 г/дм3.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками не
хуже, а также реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.
5.8.2 Порядок подготовки к проведению анализа
Навеску растворимого кофе массой 1,50 г помещают в стакан, заливают 100 см3 кипящей
дистиллированной воды. Полученный раствор охлаждают до 18—20 °С, переносят в мерную колбу
вместимостью 250 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки и используют раствор для
анализа.
5.8.3 Порядок проведения анализа
Вделительную воронку вместимостью 25 см3последовательно вносят 10—15 см3хлороформа,
2 см3 раствора кофе для анализа и 0,5 см3раствора гидроокиси калия. Закрывают воронкупритертой
пробкой и проводят экстракцию, осторожно многократно перемешивая содержимое воронки в
течение 1мин. После расслаивания смеси нижний хлороформный слой переносят в выпарительную
чашку. Хлороформ отгоняют на водяной бане досуха.
П р и м е ч а н и е— Не допускается попадание верхнего окрашенного водного слоя в нижний
хлороформный слой.
К сухому остатку, содержащему кофеин, прибавляют последовательно 1,0 см3раствора соля
ной кислоты, смывая остаток на дно чашки, и 0,2 см3раствора перекиси водорода. Содержимое
чашки перемешивают вращательным движением, выдерживают 20 мин при температуре окружаю
щей среды, затем нагревают на кипящей водяной бане до получения сухого окрашенного остатка
ТМПК.
Для приготовления водного раствора ТМПК к сухому остатку в охлажденную до температуры
окружающей среды чашку приливают 5—10см3дистиллированной воды и оставляют до его полного
растворения. Полученный раствор пурпурного цвета количественно переносят в мерную колбу
вместимостью 25 см3и доводят объем раствора до метки.
Оптическую плотность полученного раствора определяют на колориметре, используя кюветы
толщиной поглощающего свет слоя 3 см при длине волны 540 нм. Оптическая плотность исследу
емого раствора не меняется в течение 20 мин.
6
30