ГОСТ 29148-97
ПРИЛОЖЕНИЕ А
(обязательное)
ИСО 4052-83
Кофе. Определение содержания кофеина
(эталонный метод)
Введение
Описанный метод был выбран после сравнительного изучения нескольких альтернативных подходов: он
отличается широтой сферы применения, воспроизводимостью результатов, специфичностью, легкостью ис
пользования и быстротой получения результатов.
Однако этот метод весьма чувствителен к условиям его применения, поэтому существенно, чтобы
приводимые здесь инструкции выполнялись во всех деталях.
А.1 Назначение и область применения
Настоящий международный стандарт устанавливает эталонный метод определения массовой доли
кофеина в кофе.
Нижний предел прослеживаемой массовой доли кофеина составляет 0,02 % в пересчете на сухое
вещество.
А.2 Ссылки
ГОСТ 15113.0—77 Концентраты пищевые. Правила приемки, отбор и подготовка проб
ГОСТ 15113.4—77 Концентраты пищевые. Методы определения влаги
А.З Сущность метода
Метод заключается в обработке кофе раствором аммиака с целью освобождения кофеина, очистке кофеина
чистым диэтилэфиром на двух колонках (первая —со щелочной средой, вторая —с кислой средой), извлечении
кофеина чистым хлороформом и определении его массовой доли спектрофотометрическим методом.
А.4 Реактивы
Все реактивы должны быть удостоверяемого аналитического качества. Применяемая вода должна быть
дистиллированной или, по крайней мере, иметь соответствующую чистоту.
А.4.1 Серная кислота.Раствор массовойконцентрации200 г/дм3 [молярнойконцентрации
(H2S04) = 2 моль/дм3].
А.4.2 Едкийнатр.Раствормассовойконцентрации80г/дм3[молярнойконцентрации
(NaOH) = 2 моль/дм3].
А.4.3 Диатомовая земля.
Использование этого материала обеспечивает восстановление не менее 98 % кофеина, содержащегося
в анализируемой пробе.
П р и м е ч а н и е — Подходящим материалом является Celite 545.
А.4.4 Аммиак. Раствор массовой концентрации 70 г/дм3(1 часть концентрированного раствора аммиака
р2о= 0,9 г/см3 + 2 части воды).
А.4.5 Диэтиловый эфир чистый или повторно очищенный (А.7.3) хроматографически и насыщенный
водой.
Для повторной очистки пропустить 800 см3 диэтилового эфира через колонку, содержащую 100 г
основной окиси алюминия 1-го класса активности. Повторно очищенный таким образом диэтиловый эфир до
использования должен содержаться в темных бутылях.
П р и м е ч а н и е —Вместо хроматографически повторно очищенного материала может применяться
недавно дистиллированный и свободный от пероксидов диэтиловый эфир.
А.4.6 Кофеин [1,3,7-триметил-2,6-диоксопурин (C8H
i
0O2N4 ■Н20)], чистый, безводный.
А.4.7 Хлороформ чистый или повторно очищенный (А.7.3) хроматографически, как это описано в А.4.5,
и насыщенный водой.
А.5 Аппаратура
А.5.1 Хроматографические колонки (см. рисунок А.1) длиной 250 мм, внутренним диаметром 21 мм
(колонка 1) и 17 мм (колонка 2), с кранами предпочтительно из политетрафторэтилена (ПТФЭ).
А.5.2 Спектрофотометр с точностью до 0,004 единиц поглощения в рамках используемого диапазона.
А.5.3 Кюветы кварцевые толщиной поглощающего свет слоя 1 см.
А.5.4 Обычное лабораторное оборудование, включая:
А.5.4.1 Химические стаканы вместимостью 100 см3.
А.5.4.2 Баню водяную.
А.5.4.3 Мерные колбы с одной меткой вместимостью 50, 100 и 1000 см3.
А.5.4.4 Пипетки вместимостью 2 и 5 см3 с одной меткой.
А.5.4.5 Весы аналитические с погрешностью взвешивания + 0,001 г.
А.6 Отбор проб
Отбор проб —по ГОСТ 15113.0.
33
9