ГОСТ 29148-97
1—колонка 1(щелочная), длина 250 мм; 2 —хлопко
вая вата или стекловата; 3 —смесь диатомовой земли
массовой доли кофеина
(А.4 5) через обе колонки.
А.7 Проведение анализа
А.7.1 Подготовка анализируемого образца
А.7.1.1 Рассчитывают массовую долю сухого вещества
в анализируемом образце после определения массовой доли
влаги по ГОСТ 15113.4.
А.7.1.2 0,5 г натурального растворимого кофе, взвешен
ного спогрешностью+ 0,001 г, помещают в химический стакан
вместимостью 100 см3 (А.5.4.1), добавляют 5 см3раствора ам
миака (А.4.4) и помещают в кипящую водяную баню (А.5.4.2)
на 2 мин. После охлаждения количественно переносят в мер
ную колбу вместимостью 100 см3(А.5.4.3) и дистиллированной
водой доводят объем до метки, тщательно перемешивают и
оставляют до полного охлаждения. С помощью пипетки
(А.5.4.4) отбирают 2 см3 полученного раствора, помещают в
химический стакан вместимостью 100 см3 (А.5.4.1), добавляют
3 г диатомовой земли (4.3) и тщательно перемешивают.
А.7.2 О п р е д е л е н и ем а с с о в о йд о л и
к о ф е и н а
А.7.2.1 Заполнение колонок
А.7.2.1.1 Колонка 1 (щелочная) (рисунок А.1)
Тщательно перемешивают 3 г диатомовой земли (А.4.3)
с 2 см3раствора едкого натра (А.4.2) до получения однородной
смеси. (Материал для заполнения колонки может быть подго
товлен заранее и храниться в закрытых емкостях. Для каждой
щелочной колонки требуется 5,16 г смеси). Полученный влаж
ный порошок переносят частями, примерно по 2 г, в хромато
графическую колонку диаметром 21 мм (А.5.1), нижняя часть
которой заполнена набивкой из хлопковой ваты или стеклова
ты. Без особого усилия уплотняют смесь после каждого добав
ления материала, применяя для этого стеклянную палочку, до
образования однородного и плотного слоя.
Переносят в щелочную колонку слой смеси, подготов
ленной по А.7.1.2. Для исключения потерь кофеина хими
ческий стакан дважды очищают порциями диатомовой
земли по 1г и также помещают в щелочную колонку. Поверх
кладут слой хлопковой ваты или стекловаты.
А.7.2.1.2 Колонка 2 (кислотная) (рисунок А.1)
Тщательно перемешивают 3 г диатомовой земли (А.4.3)
с 3 см3 раствора серной кислоты (А.4.1)до получения однород
ной смеси. (Материал для заполнения колонки может быть
подготовлен заранее и храниться в закрытых емкостях. Для
каждой кислотной колонки требуется 6,36 г смеси). Получен
ный влажный порошок переносят частями, примерно по 3 г, в
хроматографическую колонку диаметром 17 мм (А.5.1), ниж
няя часть которой заполнена набивкой из стекловаты. Без
особого усилия уплотняют смесь после каждого добавления
материала, применяя для этого стеклянную палочку, до
и анализируемого образца;
4 —
3 г диатомовой земли
образования однородного и плотного слоя. Поверх кладут
и 2 см3NaOH (5,16 г); 5
—
хлопковая вата или стекло
слой стекловаты.
вата; 6 —кран, предпочтительно из политетрафторэ
А.7.2.1.3 О ч и с т к а и и з в л е ч е н и е к о ф е и н а
тилена; 7 — колонка 2 (кислотная), длина 250 мм;
Установить колонки одну над другой так, чтобы жид
8 —
стекловата;
9 —
3 г диатомовой земли и 3 см3
кость из щелочной колонки прямо стекала в кислотную
H2S04(6,36 г)
колонку. Пропускают постепенно 150 см3 диэтилового
Рисунок А.1 — Колонки для определения
эфира
Кран
.
колонки 2 регулируют так, чтобы на поверхности
содержимого в колонке остался тонкий слой жидкости.
После этого колонку 1 убирают, а через колонку 2 пропускают еще 50 см3диэтилового эфира. Вытекающая
из колонки 2 жидкость сливается в отходы. (Используемый диэтиловый эфир может быть восстановлен
взбалтыванием его с сернокислым железом).
Избыточное количество диэтилового эфира удаляют с помощью вакуум-насоса или резиновой груши до
тех пор, пока не прекратится стекание капель диэтилового эфира из колонки и выходящий из крана воздух
не будет нести лишь слабый запах диэтилового эфира.
Для извлечения кофеина через колонку 2 пропускают 45—50 см3хлороформа (А.4.7), который собирают
в мерную колбу вместимостью 50 см3 с одной меткой (А.5.4.3), и доводят объем до метки хлороформом.
Полученную смесь тщательно перемешивают.
1034