ГОСТ 30134-97
В каждом комплекте диагностикума необходимо провести предварительный контроль на
отсутствие спонтанной агглютинации.
Для этого на предметном стекле, по описанному выше способу, соединяют две капли
разбавителя с 1каплей специфического сальмонеллезного диагностикума и контрольного диагнос
тикума (в параллельной реакции).
Изучение реакции проводят аналогично вышеописанному.
Диагностикумы считают годными при отсутствии спонтанной агглютинации.
Положительной рАЛ считают агглютинацию частиц латекса не менее чем на два креста с
сальмонеллезным днагностикумом, при отрицательной реакции с контрольным диагностикумом.
Положительная рАЛ одновременно с двумя диагностикумами (со специфическим и контроль
ным) свидетельствует о неспецифической агглютинации и учету не подлежит.
6.10.2 Постановку рАЛ с жидких селективных питательных сред осущесталяют с Посевами I
и 2.
Для этого на предметное стекло с очерченными кружками (см. 6.10.1) наносят по две капли
магниевой среды и добааляют по одной капле сальнонеллезного или контрольного диагностикума.
Изучение реакции, как указано в 6.1.10.
7 Обработка результатов испытаний
7.1 Положительные результаты рА и рАЛ с сальмонеллезной Н-сывороткой или Н-диагности-
кумом, полученные при их постановке с изолированными колониями или в смешанной культуре на
чашках с селективными дифференциально-диагностическими средами (ВСА, Левина или Плоскн-
рева). указывают на присутствие сальмонелл.
7.2 Положительные результаты рАЛ с сальмонеллезными H-диапюстикумами, полученные
при ее постановке с жидких селективных сред или после вторичного полрашивания в СПО (см.
6.10.2), свидетельствуют об обнаружении сальмонелл.
7.3 Положительные результаты рА с поливалентной Н-сывороткой или с сальмонеллезным
Н-диагностикумом, полученные при их постановке с чистой культурой на среде КДСМ. свидетель
ствуют об обнаружении сальмонелл.
7.4 При обнаружении подозрительных на сальмонеллы колоний на плотных средах или
типичных для сальмонелл культур на КДСМ и при отрицательных результатах рА и рАЛ с
сальмонеллезной поливалентной Н-сывороткой или Н-диагностикумом необходимо дополнить
анализ постановкой рАс поливалентными стандартными сальмонеллезными сыворотками ABCDE-
групп и редких групп, или рА с поливалентными латексными сальмонеллезными диагностикумами
ABCDE-групп и редких групп, а также постановкой тестов на обнаружение индола и утилизацию
цитрата на среде Симмонса с чистыми культурами, подозрительными на сальмонеллы.
Выделение чистых культур осуществляют либо отсевом подозрительных колоний на КДСМ
(см. 6.6). либо повторным рассевом смешанных культур на среды Девина или Плоскирева (по
выбору) для выделения изолированных колоний (см. 6.3), которые повторно пересевают на КДСМ
для учета биохимических свойств.
7.4.1 Определение индолобразованин
Изучаемую культуру высевают бактериологической петлей в пробирку, содержащую 4—5 см3
пептонной воды. Посев инкубируют при (37±1) *С и встряхивают с частотой 180—200 об/мин в
течение 20 ч. К бульонной культуре добааляют 3—4 капли реактива Эрлиха или Ковача (по выбору).
Появление розового или красного окрашиалния свидетельствует об образовании индола
изучаемой культурой.
Подавляющее большинство штаммов сальмонелл не образуют индола.
7.4.2 On/tede.ienueути.шзации цитрата пи среде Симмонса
Стандартную среду Симмонса приготоаляют. разливают по пробиркам и скашивают всоответ
ствии с указаниями на упаковке среды.
Исследуемый штамм в чистой культуре высевают штрихом по скошенной поверхности среды.
Посев выращивают при (37±1)’С в течение 24—48 ч. Положительный результат —видимый
рост культуры и посинение среды.
Подааляюшее большинство сальмонелл способны давать видимый рост и изменение цвета
среды Симмонса.
7.4.3 Результаты серологических реакций с чистыми и смешанными культурами оценивают по
таблице 1.
1177