ГОСТ ISO 10633-1—2022
8.4.4 Пробирку (см. 5.6) помещают под колонку для сбора элюата. Элюируют полученные десуль-
фоглюкозинолаты двумя порциями воды по 1 см3, позволяя воде стекать после каждого добавления.
8.4.5 Элюат тщательно перемешивают. Если элюат не используется для хроматографии сразу,
то допускается его хранение в темноте при температуре минус 18 °С в морозильной камере в течение
недели.
8.5 Контрольное определение
Если требуется (см. 9.3), то проводят контрольное определение с применением аналогичной про
цедуры на анализируемой пробе, взятой из того же испытуемого образца, но без использования рас
твора внутреннего стандарта синигрина, что позволит обнаружить и определить количество синигрина,
присутствующего в анализируемой пробе.
8.6 Проведение хроматографического анализа
8.6.1 Настройка оборудования
Хроматограф (см. 5.1) настраивают следующим образом:
- расход подвижной фазы (см. 4.6) зависит от типа используемой колонки (см. 8.6.2) и обычно со
ставляет 1 см3/мин;
- температура колонки (см. 5.2): 30 °С;
- длина волны 229 нм.
8.6.2 Определение
Действуя в соответствии с инструкциями к оборудованию, в хроматограф вводят не более чем
50 мкл раствора десульфоглюкозинолата, полученного в соответствии с 8.4.4.
Используется градиентное элюирование, соответствующее используемой колонке.
Примечание 5 — Следующие градиенты элюирования приведены в качестве примеров:
a) Для колонки Lichrosorb RP18, < 5 мкм (150 * 4,6 мм):
- 100 % элюента А (см. 4.6.1) в течение 1 мин;
- линейный градиент элюирования в течение 20 мин до получения 0 % элюента А и 100 % элюен
та В (см. 4.6.2);
- линейный градиент элюирования в течение 5 мин до получения 100 % элюента А и 0 % элю
ента В;
- 100 % элюента А (см. 4.6.1) в течение 5 мин для установления равновесия.
b
) Для колонки Lichrospher RP18, < 5 мкм (125 * 4 мм):
- 100 % элюента А (см. 4.6.1) в течение 2 мин 30 с;
- линейный градиент элюирования в течение 18 мин до получения 0 % элюента А и 100 % элю
ента В;
- 100 % элюента В в течение 5 мин;
- линейный градиент элюирования в течение 2 мин с ростом доли элюента А до 100 % и одновре
менным снижением доли элюента В до 0 %;
- продолжать в течение 5 мин для установления равновесия.
Примечание 6 — Профили градиента могут быть изменены для получения оптимального разделения в
соответствии с используемыми колонками.
8.6.3 Обработка хроматограмм
Учитываются только те пики, площадь которых более 1 % от общей суммы площадей пиков.
Порядок элюирования пиков колонки типа С18 с соответствующим градиентным элюированием
(в соответствии с примерами, приведенными в 8.6.2), как правило, соответствует представленному на
рисунке 1.
9 Обработка результатов
9.1 Расчет содержания глюкозинолатов
Содержание каждого глюкозинолата Су, выраженное в микромолях на грамм сухого вещества про
дукта, вычисляют по формуле
5