ГОСТ Р 50455-92
К о с а яп о в е р х н о с т ь
желтая
лактоза н(или) сахароза конвертирована
красная или без изменений
ни лактоза, пи сахароза не конвертирована
9.7.2.1.2 Агаре мочевиной (Кристенсена)
Делают посев штрихами на косую поверхность агара. Выдерживают в термостате при темпера
туре (37±1) *С в течение 1—2 сут.
В результате расщепления мочевины выделяется аммиак, который изменяет окраску феноло
вого красного на розовую, а затем на темно-вишневую.
9.7.2.1.3 Среда декарбоксилировання лизина
Делают посев на поверхность жидкой среды. Выдерживают в термостате при температуре
(37±1) *С в течение 1 сут. Появление темно-красной окраски после начала роста колоний указывает
на положительную реакцию. Желтая окраска указывает на отрицательную реакцию.
9.7.2.1.4 Реактив р-галактозидазы
Подвешивают петлю с предполагаемой колонией в пробирке с 0,25 см3 солевого раствора.
Добавляют одну каплю толуола и встряхивают пробирку. На несколько минут помешают пробирку
на водяную баню при температуре (37±1) *С. Затем добавляют 0.25 см3 реактива р-галактозидазы и
перемешивают. Снова помещают пробирку на водяную баню при температуре (37±1) ’С на 24 ч (см.
примечание). Желтая окраска указывает на положительную реакцию.
Пр и м е ч а н и е — Реакция проявляется через 20 мин.
9.7.2.1.5 Реакция Вогса — Проскаэра — реактив ВГ1
В две пробирки, содержащие по 0,2 см3 среды петлей пересевают предполагаемые колонии.
Одну из пробирок выдерживают при комнатной температуре, а другую — при 37 *С в течение 1 сут.
Затем в каждую пробиркудобавляют по две капли раствора креатина, три капли спиртового раствора а-
нафтола и две капли реактива КОН, встряхивая после каждого добавления.
Изменение розового цвета на ярко-красный в течение 15 мин указывает на положительную
реакцию.
9.7.2.1 Индольная реакция — триптон-тригттофановая среда (по Лютову) или реактив Ковакса
Делают посев предполагаемой колонии в пробирку с 5 см3 среды. Выдерживают в термостате
при температуре 37 *С в течение 24 ч. Затем добавляют I см3 индольного реактива. Образование
красного кольца указывает на положительную реакцию. Желтовато-коричневое кольцо указывает
на отрицательную реакцию.
9.7.2.2 Интерпретация результатов (см. таблицу)
9.7.3 Серологическое подтверждение
Проверяют чистые лесамоагтлютннирующие колонии на присутствие
О, Vi
или Н антигенов
сальмонелл путем агглютинирования сывороткой на предметном стекле.
Р е а к ц и я , у к а д м и а ю ш а я н а п р и с у т о в и с
сальмонелл*
П о л о ж и т е л ь н а я п ли
о т р и ц а т е л ь н а я р е а к ц и я
П р о ц е н т н о е с о д е р ж а н и е с е р о ти и о п
с а л ь м о н е л л , л а ю щ и х р е ак ц и ю * *
+
+
_**•
—
+
—
ТСЖ глюкоза (образование кислоты)
ТСЖ глюкоза (образование газа)
ТСЖ лактоза
ТСМ сахароза
ТСЖ сероводород
Разложение мочевины
Дскарбоксилированис лизина
Реакция на (}-галактозидазу
Реакш ш
Вогса — Проскаэра
Индольная реакция
_*♦*
—
—
1 0 0
91.9
99.2
99.5
91.6
100
94.6
98.5
100
98.9
* См. также В.Х. Эвинг и М.М. Болл. Биохимические реакции сальмонелл (1966). Национальный центр
но изучению инфекционных заболевании. Атланта, штат Джорджия. США.
*“ Процентное содержание указывает на то. что нс все штаммы сальмонелл дают положительные или
отрицательные реакции, и оно может изменяться в зависимости от вида продукта или места изготовления.
*** Подвид 111 сальмонелл (Аризона) может давать положительную реакцию на лактозу и Р-галактозилазу.
Подвид II сальмонелл может лавагь отрицательную реакцию на лактозу, но положительную на
р-галактозидазу.
9710