ГОСТ Р 54635―2011
5.2 Требования к квалификации оператора
К выполнению испытаний и обработке результатов допускаются лица с высшим или средним спе-
циальным образованием по профессиям химик, инженер-химик, техник, лаборант, с опытом работы в
химической лаборатории. Первое применение метода в лаборатории следует проводить под наблюде-
нием квалифицированного специалиста в области ВЭЖХ.
6 Условия выполнения испытания
6.1 Общие условия
Испытания проводят в нормальных лабораторных условиях: температура окружающей среды —
(25 ± 5) °С; относительная влажность — (65 ± 15) %; частота переменного тока — (50 ± 5) Гц; напряже-
ние в сети — (220 ± 10) В.
При приготовлении и хранении растворов следует выполнять требования ГОСТ 27025, ГОСТ 4517.
Для предотвращения разрушения витамина А анализ испытуемого материала и стандартов про-
водят в присутствии антиоксиданта (аскорбиновой кислоты, гидрохинона, пирогаллола), предохраняя
пробы от попадания на них прямого солнечного света.
6.2 Условия фотометрических измерений
Условия фотометрических измерений приведены в таблице 1.
Таблица 1 — Условия фотометрических измерений
Витамин А
Растворитель
Длина волны, нм
Ретинол
Этанол
325
1832
Ретинола ацетат
Ретинола пальмитат
Удельный коэффициент
поглощения E
1
с
м
1%
Этанол3281550
2-пропанол328975
6.3 Условия хроматографического анализа
Температура хроматографической колонки: 25 °С или температура окружающей среды.
Скорость потока подвижной фазы: 0,7 см
3
/мин (ориентировочное значение).
Объем вводимой пробы: 50 ∙ 10
–3
см
3
.
Подвижная фаза: смесь ацетонитрила, метилового спирта, метилена хлористого в объемном со-
отношении 50:45:5.
Проверку оптимальности условий хроматографического разделения осуществляют путем хро-
матографического анализа смешанного раствора ретинола, ацетата ретинола, пальмитата ретинола с
массовой концентрацией каждого вещества не менее 0,4 мкг/см
3
. Данный смешанный раствор готовят
из основных растворов ретинола, ацетата ретинола, пальмитата ретинола по аналогии с методикой
приготовления рабочих растворов по 8.1.2. Эффективность хроматографического разделения призна-
ется удовлетворительной, если коэффициент разделения соседних пиков ретинола, ацетата ретинола,
пальмитата ретинола составляет не менее 1,3. В противном случае для достижения требуемой эф-
фективности разделения экспериментальным путем подбирают скорость потока подвижной фазы или
проводят испытания других колонок.
7 Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы
и материалы
3
7.1 Для определения содержания массовой доли витамина А применяют следующие средства из-
мерений, вспомогательное оборудование и материалы:
- весы по ГОСТ Р 53228, обеспечивающие точность взвешивания с пределами допускаемой абсо-
лютной погрешности ± 0,1 мг;
- спектрофотометр со спектральным диапазоном работы от 190 до 1100 нм, основной погрешно-
стью измерений коэффициента пропускания не более 1 %;