ГОСТ Р 50474— 9$ С. 3
4. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ
более 3 мес.
4.1. Приготовление растворов
4.1.1. Щелочной раствор бромкрезолового пурпурного концент
рацией 10 г/дм3: I г бромкрезолового пурпурного переносят о фар
форовую ступку с 19 см3 раствора гидроокиси натрия c(NaOH) =
=0,1 моль/дм3 и после растворения добавляют 80 см3дистиллиро
ванной воды.
4.1.2. Раствор бриллиантового зеленого концентрацией 5 г/дм3:
0.5 г бриллиантового зеленого переносят в фарфоровую ступку и
постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор перели
вают в мерную колбу вместимостью 100 см1 и доводят дистилли
рованной водой до метки.
4.1.3. Раствор генцнанвнолета или кристаллического фиолето
вого, или метилового фиолетового концентрацией 10 г/дм3: 1 г од
ной нз анилиновых красок переносят в фарфоровую ступку и по
степенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор перели
вают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят дистилли
рованной водой до метки.
4.1.4. Раствор фенолового красного концентрацией 2 г/дм3:
0,2 г фенолового краевого переносят и фарфоровую ступку и по
степенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор перели
вают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят дистилли
рованной водой до метки.
4.1.5. Растворы, приготовленные по пп. 4.1.1—4.1.4, хранят в
закрытых сосудах из темного стекла при комнатной температуре
не
4.1.6. Растворы и реактивы для окраски по Граму готовят по
ГОСТ 10444.1.
4.2. Приготовление питат ельных сред
4.2.1.Агар лактозный с бриллиантовым зеленым и феноловым
красным: 3,0 г мясного экстракта, 10,0 г пептона, 10,0 г лактозы,
5,0 г хлористого натрия, 0,5 г фосфорной целого двузамещенного
калия, 15.0 г агара добавляют к 1000 см3дистиллированной воды.
При отсутствии мясного экстракта допускается использовать вме
сто мясного экстракта, пептона и дистиллированной воды мясо-
пептонный бульон по ГОСТ 10444.1. Смесь нагревают до полного
растворения компонентов, охлаждают до 45—55°С, устанавливают
pH так, чтобы после стерилизации он составлял при 25°С (7,0±
±0,1). Среду стерилизуют в течение 20 мни при температуре
.(П5±1)Х, затем охлаждают до 45—55°С и прибавляют 40 см3
раствора фенолового красного, приготовленного по п. 4.1.4, и 2 см3
раствора бриллиантового зеленого, приготовленного по п. 4.1.2,
тщательно перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри,
колбы или флаконы.