ГОСТ 12044-93
Второй способ. Семена помешают в эмалированную или стеклянную посуду, заливают
3 %-ным раствором щелочи и кипятят около I ч до полного отделения зародышей от эндосперма.
Затем содержимое из посуды пропускают через набор лабораторных решет с диаметром
отверстой 5, 3 и 1 мм с последующей промывкой их проточной водой. Зародыши, оставшиеся на
последнем решете, переносят в колбу вместимостью 250 см3 и кипятят 40 мин в 15 % — 20 %-
ном растворе щелочи, взятой в количестве 200 см3, после чего их тщательно отмывают от
щелочи. Отмытые зародыши помещают в стеклянный бюкс или колбу, где налито небольшое
количество раствора анилинового синего или тринанового синего красителя в концентрации 0.1
%, доводят до кипения на электроплитке или спиртовке и кипятят в течение 10—20 с. При
работе с химикатами следует соблюдать меры предосторожности. Потеря зародышей после всех
операций не должна превышать 20 %. Зародыши можно хранить в 50 %-ном водном растворе
глицерина. После кипячения каждый зародыш просматривают под микроскопом или
бинокулярной лупой при увеличении (12х — 15х). 13поле зрения должен быть виден один зародыш.
Покровным стеклом зародыш накрывать не следует.
9.1.2.3 Зародыши располагают в рядки, очерченные восковым карандашом, с помощью пре
паровальных игл или небольшого скальпеля, и просматривают под микроскопом на предметном
стекле или вчашках Петри. Зародыши необходимо просматривать в основном со стороны зародыше
вой почки, корешков и колеоптиля (приложение Е), где может располагаться мицелий, и со сторо ны
щитка. Грибница головни при малом увеличении микроскопа представляет собой комочки спу
танных гифов мицелия. Гифы окрашены в сине-голубой цвет, имеют толщину 3 мкм. Встречаются
редкие случаи, когда в ткани щитка находятся другие грибы помимо головни, но они имеют другое
строение и ясно различимы.
9.1.3 Обработка результатов
Подсчитывают все инфицированные зародыши независимо от места локализации мицелия в
органах эмбриона и вычисляют их содержание в процентах к числу просмотренных зародышей.
Например, всего проанализировано 2000 зародышей, из них пораженных оказалось 10; процент
поражения составляет 0,5 %.
10 Биологический метод
Метод применяют для выявления внешней и внутренней зараженности семян болезнями. Он
основан на стимуляции развития и роста микроорганизмов в зараженных семенах.
Зараженность семян определяют при проращивании их во влажной камере, на питательных
средах, песке или в рулонах фильтровальной бумаги.
10.1 Анализ семян во влажной камере
При прорашивании семян во влажной камере заболевания, вызываемые бактериями, выявля
ют по размягчению и ослизнению тканей семени. Заболевания, вызываемые грибами на проросших
и непроросших семенах, проявляются в виде пятен различной формы и окраски, налета грибницы,
пикнид. уродливости, деформации или отмирания частей проростков.
Для контроля правильности идентификации патогенов применяют микроскопировапие.
10.1.1 Отбор проб
10.1.1.1 Из средней пробы, предназначенной для анализа семян на зараженность болезнями,
выделяют навеску. Из семян основной культуры отбирают четыре рабочие пробы по 50 или 100
семян в зависимости от вида анализируемых культур.
10.1.2 Подготовка к анализу
10.1.2.1 Для проращивания семян во влажной камере применяют стерильные сухие чашки
Петри. Коха или стеклянные стаканы, накрытые стеклом. На дно чашек (стаканов) помешают
марлю в три слоя или фильтровальную бумагу в два слоя, или фильтровальную бумагу, положенную на
гигроскопическую вату, толщиной слоя не более 0,25 см.
Марлю, комбинированный субстрат или фильтровальную бумагу в чашках Петри или Коха
уазажняют с помощью пипетки, слегка приоткрывая при этом с одного края крышку чашки. Ув
лажнение считают нормальным, если при наклоне чашки с марлевых кружочков или фильтроваль
ной бумаги стекает несколько капель воды.
Семена раскладывают на ложе с помошыо пинцета на расстоянии 1—2 см друг от друга в
зависимости от их крупности.
6
160