ГОСТ 12044-93
кориандра; спор ржавчины на клубочках свеклы и семенах аниса; спор и мицелий церкоспороза на
семенах фенхеля. На зерновых культурах этим способом можно определить зараженность семян ржи
стеблевой и твердой головней, пшеницы — стеблевой и твердой головней, ячменя — каменной и
черной (ложной пыльной) головней, кукурузы — пыльной головней, проса — обыкновенной мел
коспоровой головней, риса — гельминтоспориозом, фузарнозом, головней (приложения Г. Д, Ж, Л.
М и П).
7.1 Отбор проб
7.1.1 Для проведения анализа из семян основной культуры отсчитывают подряд две рабочие
пробы по 100 семян в каждой.
7.2 Проведение анализа
7.2.1 Каждую рабочую пробу помешают в пробирку, заливают 10 см’ воды и взбалтывают.
Семена с гладкой поверхностью (пшеница, рожь) взбалтывают в течение 5 мин, семена с шерохо
ватой поверхностью (свекла и др.) — 10 мин, семена льна — 1 мин. Полученные суспензии можно
обследовать непосредственно под микроскопом для идентификации патогенов или можно выделить
споры путем центрифугирования. В случае центрифугирования промывную воду от каждой пробы
семян сливают в отдельные пробирки центрифуги и центрифугируют в течение 10—15 мин при
скорости 2000—2500 об/мин. Если в центрифуге не все пробирки заняты суспензией, то свободные
заполняют для равновесия чистой водой до того же уровня. По окончании центрифугирования из
пробирок осторожно отбирают 9 см’ надосадочной жидкости. Оставшийся осадок взмучивают пи
петкой и из каждой пробирки готовят по пять препаратов. Для установления вида гриба препараты
просматривают под микроскопом.
Количественный учет спор проводят в камере Горяева.
Зараженность спорами одного семени (.V) в штуках вычисляют по формулам:
при подсчете в камере Горяева без предварительного центрифугирования
—ПкГ’
к
=
-vc10.
(,)
при подсчете в камере Горяева с предварительным центрифугированием
2
X
( )
V
где Л’с — количество спор в 1 см3суспензии, шт.;
10 - объем воды, взятой для смыва, см3;
100 — количество семян, взятых для анализа, шт.
Величину
j в
1
см3суспензии рассчитывают, умножая обнаруженное число спор на
250
тыс.,
если подсчет спор ведут в больших квадратах камеры Горяева, и на
400
тыс., если споры подсчиты
вают в малых квадратах камеры; если же подсчет ведут по всей плошали камеры, то обнаруженное
число спор умножают на 1111.
За результат анализа принимают среднеарифметическое результатов двух проб.
8 Метод отпечатков
Метод применяют вместо центрифугирования для определения поверхностей заспоренностн
семян зерновых культур головневыми грибами.
8.1 Отбор проб
8.1.1 Из семян основной культуры отсчитывают К) семян.
8.2 Проведение анализа
8.2.1 Каждое семя обертывают отрезком прозрачной клейкой ленты размером 1 см2, плотно
прижимая его по всей поверхности семени. Затем с помощью пинцета ленту отклеивают и помеща ют
на предметном стекле под микроскоп для идентификации патогена и подсчета спор. Подсчет спор
проводят в 10 полях микроскопа в соприкасавшихся с семенем частях отрезка ленты и устанав
ливают среднеарифметическое количество спор в одном поле зрения микроскопа.
Для пшеницы и ячменя с помошыо окуляр-линейки под микроскопом при однократном уве
личении объектива измеряют длину и ширину семени с точностью до 0.1 мм.
4158