Электронная версия
ГОСТ 26573.1-93 С. 7
делительной воронке дистиллированной воды до нейтральной среды (по универсальному индика
тору). Промытый экстракт переносят в перегонную колбу через беззольный фильтр (красная лента),
заполненный безводным сульфатом натрия (40—50 г). Делительную воронку и сульфат натрия на
фильтре промывают два раза порциями по 20 см3гексана. Гексан из колбы отгоняют на ротацион
ном испарителе при температуре 70 *С. Сухой остаток растворяют в 10 см3 гексана, который
добавляют порциями по 2—3 см3, и переносят в предварительно откалиброванную пробирку
вместимостью 10 см3с притертой пробкой.
Стандартный раствор витамина А обрабатывают параллельно. Отбирают 1 см3 стандартного
раствора, выполняют омыление и экстрагируют, как при обработке образцов. Полученный экстракт
витамина А в 10 см3 гексана используют для хроматографического анализа в качестве внешнего
стандарта. Измерение проводят в нормально-фазном режиме.
Растворы экстрактов анализируемого образца и стандартного раствора хроматографируют в
одинаковых условиях. С помощью микрошприца в колонку вводят испытуемые растворы (экстракт
стандарта или анализируемого образца). При низком содержании витамина А в премиксе загрузку
растворов в колонку увеличивают. Получают хроматограммы, аналогичные приведенным на черт. 3.
Измеряют высоты пиков, соответствующих времени удержания витамина Л. как расстояния от
вершины пиков до линии, проведенной в основании пика. Эти значения используют в дальнейшем для
расчета содержания витамина А в испытуемом образце. Наиболее благоприятные условия для
определения создаются, когда высоты пиковстандарта и определяемого вещества на хроматограмме
соизмеримы. Эти условия могут быть созданы изменением концентрации стандартного раствора
или объемов загрузки в хроматограф экстрактов стандарта и премикса.
3.4. Об раб от ка результатов
Содержание витамина Л(Х2), МЕ/г, вычисляют по высотам пиков хроматограмм экстрактов
стандартного раствора и испытуемых образцов по формуле
х
ш
0
*-К
1
Кг _
где (?
а
— количество витамина А, используемое дтя приготовления стандартного раствора. ME:
Vt — аликвота стандартного раствора, используемая на омыление, см3;
Vx — объем мерной колбы со стандартным раствором витамина А, см3;
т — масса навески премикса, используемая на омыление, г;
Vtl, Vx— объемы загрузки в хроматограф пробы стандарта и премикса, мкдм3;
Л4,— высоты пиков премикса и стандарта на хроматограмме, мм.
За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатовдвух
параллельных измерений. Результаты вычисляют до четвертой значащей цифры и округляют до
третьей значащей цифры.
Допускаемые расхождения между результатами двух параллельных определений при довери
тельной вероятности Р= 0,95 не должны превышать 10 % относительно среднего арифметического
значения, а между результатами, полученными в разных условиях, — 15 %.
4. Колориметрический метод определения витамина А
Сущность метода заключается в омылении пробы премикса спиртовым раствором щелочи,
экстракции неомыленной фракции этиловым эфиром и колориметрическом измерении оптической
плотности испытуемого раствора с треххлористой сурьмой.
Метод применяют для определения витамина А в премиксах, не содержащих кормовой
концентрат лизина.
4.1. Аппаратура, реактивы и материалы
Фотоэлектроколорнметр марки КФК-2 или других аналогичных марок со спектральным
диапазоном работы 315—980 нм.
Спектрофотометр со спектральным диапазоном работы 186—1100 нм.
Весы лабораторные 2-го класса точности с наибольшим пределом взвешивания 200 г по
ГОСТ 24104.
Шкаф сушильный с терморегулятором, обеспечивающий постоянство температуры (110±2) "С.
Испаритель ротационный по ГОСТ 15150 или аналогичный.
Баня водяная.
45