Электронная версияГОСТ 26573.1-93 С. 9
для обезвоживания добаатяют в него безводный сернокислый натрий и ставят в темное место на
30 мин. После этого хлороформ отгоняют и хранят в темной склянке в прохладном месте.
4.2.4. Приготовление раствора треххюристой сурьмы
Для приготовления раствора треххлористой сурьмы в хлороформе берут па каждые 100 см3
хлороформа 23 г треххлористой сурьмы, растворяют при нагревании на водяной бане при темпера
туре около 40 *С и оставляют в темном месте на 7 сут для выделения примесей и поды.
Прозрачный раствор сливают в темную склянку, фильтруя через фильтр с безводным
сульфатом натрия, добаатяют в него 2 % уксусного ангидрида (по объему), закрывают
притертой пробкой и хранят в прохладном месте. При появлении в процессе хранения мутного
осадка раствор использованию не подлежит.
4.2.5. Определение активности витамина Л в масляном препарате —по п. 2.2.5.
4.2.6. Построение градуировочного графика
Точную навеску масляного препарата, содержащего около 100тыс. ME витамина А —ретинола
ацетата, переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 и растворяют в хлороформе. Получают
основной раствор с активностью 1000 ME витамина А в 1см3.
Из полученного основного раствора готовят рабочие растворы, содержащие 5. 10, 15, 20,
25, 30 ME витамина А в 1см5. Язя этого соответственно 0.5; 1,0; 1.5; 2,0; 2,5: 3.0 см5основного
раствора помещают в мерные колбы вместимостью 100 см3и объем в колбах доводят хлорофор
мом до метки.
Из каждого рабочего раствора отбирают в кювету с толщиной слоя I см5фотоэлектроколори
метра 0.4 см5и вносят в нее 4 см’ раствора треххлористой сурьмы.
Интенсивность образовавшейся окраски определяют на фотоэлектроколориметре при крас
ном светофильтре и длине волны 590 нм не позднее 5 с после внесения раствора треххюристой
сурьмы.
Но полученным данным строят градуировочный график.
При смене реактивов, особенно раствора треххлористой сурьмы в хлороформе, градуировоч
ный график строят вновь.
Отмывку кювет после треххюристой сурьмы проводят водным раствором соляной кислоты
(1:1) с последующим неоднократным ополаскиванием водой. Растворы витамина А готовят в день
построения градуировочного графика.
4.3. П р о в е д е н и е и с п ы т а н и я
Навеску премикса массой 2—5 г помещают в колбу вместимостью 200—250 см3, снабженную
обратным холодильником, приливают 50 см3 96 %-ного этилового спирта, добавляют 40—50 мг
пирогаллола (на кончике скальпеля) и ставят в кипящую баню для омыления. В момент начала
кипения прибаатяют 5 см3раствора гидроокиси калия или натрия с массовой долей 50 %.
Омыление проводят в течение 30 мин с момента начала кипения, периодически взбалтывая,
по истечении этого времени содержимое колбы быстро охлаждают под струей воды до комнатной
температуры.
Для экстракции витамина Л в колбу добаатяют 50 см3 эфира, хорошо взбалтывают и содер
жимое колбы переносят в делительную воронку вместимостью 500 см3, в которую предварительно
вносят около 50 см3дистиллированной воды. Экстракцию витамина А эфиром проводят трехкратно
порциями по 30—50 см3.
Все эфирные вытяжки собирают в делительную воронку и промывают дистиллированной
водой до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с фенолфталеином).
Затем эфирную вытяжку обезвоживают путем пропускания через бумажный фильтр, на
который помещен безводный сернокислый натрий. Последний промывают несколькими порциями
эфира, который фильтруют в ту же колбу.
Эфир отгоняют досуха на водяной бане при температуре не выше 50 "С в токе азота или под
вакуумом, используя водоструйный насос или ротационный испаритель. Сухой остаток сразу же
растворяют в хтороформе, переносят в мерную колбу вместимостью 50—100 см’ (в зависимости от
содержания витамина А в рецепте премикса) и объем доводят до метки хлороформом. Допускается
проводить омыление и экстрагирование, как указано в п. 3.3.
Далее проводят цветную реакцию с раствором треххтористой сурьмы, как описано при
построении градуировочного графика. Интенсивность окраски устанавливают на фотоэлектроко
лориметре с красным светофильтром (длина волны 590 нм) относительно хтороформа в кювете
с толщиной слоя I см.
47