ГОСТ 33923—2016
Приложение Б
(рекомендуемое)
Методика определения массовой доли сахарозы, лактозы
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Диапазон измерений массовой доли сахарозы в продуктах от 20,0 %до 60,0 %, диапазон измерений массо
вой доли лактозы в продуктах от 0.5 %до 20.0 %.
Б.1 Сущность метода
Метод основан на определении сахарозы, лактозы в фильтрате, полученном после удаления из пробы жира
и белка, методом высокоэффективнойжидкостной хроматографии при разделении на аминолролильной колонке. По
лученныерезультаты измерения сравниваютсо значениями массовойдоли сахарозы, лактозы в стандартном образце.
Б.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы
Хроматограф жидкостный высокоэффективный, включающий следующие элементы:
- колонку с привитой аминопропильной фазой, длиной 250 мм и размером внутреннего диаметра 4.6 мм.
зернением 3 мкм;
- детектор высокочувствительный рефрактометрический с порогом шума не более 5 ■10 ° единиц рефракции;
- насос с пульсацией не более 1 % при давлении на колонку от 1.5 до 4.0 МПа;
- термостат для хроматографических колонок, обеспечивающий поддержание температуры (25 ± 2) ’С;
- устройство петлевое для ввода пробы, рабочим объемом петли 0.020 см3;
- программное обеспечение по управлению хроматографом и обработке хроматографических данных.
Весы неавтоматическогодействия поГОСТ OIML R 76-1 или весы по нормативным документам, действующим
на территории государств, принявших стандарт, с пределами допускаемой абсолютной погрешности однократного
взвешивания ± 0.001 г.
Дозаторы пипеточные переменного обьема дозирования в диапазоне 0.040-1.000 см3.
Микрошприц для ВЭЖХ вместимостью 0.100 см3.
Часы электронно-механические по ГОСТ 27752.
Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.
Баня ультразвуковая лабораторная рабочим объемом не менее 2 дм3.
Колбы мерные 1-100-2. 1-1000-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки градуированные 1-1-2-10 по ГОСТ 29227.
Пипетки с одним делением 1(2)-2-5. 1(2>-2-10. 2-2-20 по ГОСТ 29169.
Воронки В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.
Насос водоструйный лабораторный по ГОСТ 25336.
Прибор для фильтрования стеклянный с фильтром с размером диаметра 0.45 мкм.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026, фильтры с размером диаметра 12.5 см.
Фильтр нейлоновый с размером пор 0.45 мкм.
Образец стандартный лактозы, массовой долей основного вещества не менее 99.0 %.
Образец стандартный сахарозы, массовой долей основного вещества не менее 99.0 %.
Калий железистосинеродистый по ГОСТ 4207. х.ч.
Кислота уксусная по ГОСТ 61.
Цинк уксуснокислый по ГОСТ 5823. чд.а
Ацетонитрил. ч.д.а.
Вода для лабораторного анализа, первой степени чистоты (бидистиллированная) по действующей норма
тивной документации.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применениедругих средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеу
казанным пометрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающих необходимую точность измерения, а
также реактивов и материалов, по качеству не хуже вышеуказанных.
Б.З Отбор проб
Отбор проб — по ГОСТ 26809.1.
Б.4 Подготовка к проведению измерений
Б.4.1 Подготовка стандартного раствора углеводов
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 1 г стандартного образца лактозы с записью результата до
третьего знака после запятой и 2 г стандартного образца сахарозы с записью результата до третьего знака после
запятой, растворяют в небольшом количестве бидисгилпированной воды. Обьем раствора доводят бидистилли-
рованной водой до метки.
10