ГОСТ ISO 15141-2—2013
6.10 Определение
Незамедлительно проводят хроматографию образца. Для выполнения определения посредством
метода внешнего стандарта определяют площадь пика или высоту пика, и сравнивают результаты с
соответствующими значениями стандартного вещества с ближайшей площадью/высотой пика или ис
пользуют градуировочную кривую. В случае градуировочной кривой для нее готовят дополнительные
растворы с концентрациями в диапазоне линейной зависимости.
Вводят равные объемы исследуемого раствора и стандартного раствора, используемые для по
строения градуировочной кривой.
Находят массу охратоксина А, в нанограммах, соответствующую флуоресценции исследуемого
раствора на градуировочной кривой.
Если охратоксин А. содержащийся в образце, находится вне градуировочной кривой, изменяют
количество введенного образца путем концентрирования или разбавления исследуемого раствора.
6.11 Подтверждение
При необходимости подтверждают идентификацию охратоксина А с помощью хроматографии
производного метилового эфира (примерно на 15 мин больше).
Количественно переносят оставшийся исследуемый раствор (см. 6.6) в делительную воронку
емкостью 25 см3(см. 5.8). споласкивают виалу 3 раза 1см3дихлорметана (см. 4.10). Встряхивают идают
слоям разделиться. Отбирают нижний слой в виалу (см. 5.16) и выпаривают досуха.
Переносят 0.1 см3стандартного раствора охратоксина А (см. 4.18) в другую пробирку (см. 5.16) и
выпаривают досуха.
Добавляют 0.5 см3 раствора трифторида бора в метаноле (см. 4.15) в каждую виалу. закрывают
крышкой и нагревают в течение 15 мин на водяной бане с температурой (50-60) °С. Выпаривают досуха на
водяной бане под током азота.
Если присутствует вода, добавляют 1см3 ацетонитрила (см. 4.9)и продолжают выпариваниедосуха.
Охлаждают и разбавляют подвижной фазой (см. 4.12) до такогоже объема, который использовался для
анализа методом ВЭЖХ исследуемого раствора (см. 6.7.3). и подвергают этот раствор хроматографи
ческому разделению в условиях, как описано в 6.7.
Полноту дериватиэации проверяют по хроматограммам.
7 Обработка результатов испытаний
Массовую долю охратоксина A, wOTA, мкг/кг, вычисляют по формуле
Wont =
(
2
)
R.\ —
где Rs —
отклик введенного исследуемого раствора, измеренного как площадь пика или высота пика;
V ? -
конечный объем раствора исследуемого образца (здесь 0,5 см3);
вычисленный средний нормализованный отклик (откликдля 1нг охратоксина А) пяти разных
градуировочных растворов (см. 4.19);
V , -
объем введенного анализируемого образца (здесь: 0,025 см3);
масса анализируемого образца в конечном экстракте, в данном случае;
50 г х 50 см3х 5 см3 /250 см3х Ю см3= 5 г.
Результатокругляют додвухдесятичныхзнаков после запятой и записываютв протоколе испытания.
Указывают, применялась ли поправка на выход (извлечение).
8 Прецизионность
8.1 Общие положения
Сведения по межлабораторным испытаниям прецизионности метода в соответствии с(1)обобщены
в приложении А. Значения, полученные при межлабораторном испытании, могут быть не применимыми
к диапазонам концентрации аналита и матрицам, отличным от тех, которые указаны в приложении А.
5