ГОСТ ISO 15141-2—2013
4.1 Хлороформ, стабилизированный 2-метил-2-бутеиом или этанолом.
4.2 Фосфорная кислота, с (Н3Р04) = 0.1 моль/дм3.
4.3 Диатомовая земля
900 гдиатомовой земли, обработанной кислотой, на всю ночь помещают в метанол (см. 4.7). Филь
труют черездвойной слой бумаги в воронку Бюхнера (см. 5.6). промывают 8 дм3воды исушат в течение 12
ч при температуре 150 °С.
4.4 Раствор бикарбоната натрия, с (NaHC03) = 30 г/дм3.
4.5 Этилацетат
4.6 Толуол
4.7 Метанол
4.8 Ледяная уксусная кислота (СН3СООН) = 98 %
4.9 Ацетонитрил
4.10 Дихлорметан
4.11 Раствор для элюирования: смешивают в объемном отношении 95:5: 0.5 этилацетат (см. 4.5),
метанол (см. 4.7) и ледяную уксусную кислоту (см. 4.8).
4.12 Подвижная фаза: смешивают ацетонитрил (см. 4.9), воду и ледяную уксусную кислоту (см. 4.8)
в объемном соотношении 99 : 99 : 2 идегазируют.
4.13 Смесь растворителей: смешивают толуол (см. 4.6) и ледяную уксусную кислоту (см. 4.8) в
объемном соотношении 99:1.
4.14 Трифторид бора
4.15 Трифторид бора, раствор в метаноле, с (BF3) = 14 г/см3
П р и м е ч а н и е — Испытания проводят в вытяжном шкафу, избегая контакта с кожей, глазами и дыхатель
ными путями.
4.16 Охратоксии А. кристаллический и в жидком виде
4.17 Охратоксии А. основной раствор
Растворяют 1мг охратоксина А (кристаллы) (см. 4.16) или содержимое 1ампулы (в жидком виде) в
смеси растворителей (см. 4.13)для получения раствора, содержащего от 20до 30 мкг/см3охратоксина А.
Для определения точной концентрации регистрируют спектр поглощения между длиной волны
300 нм и 370 нм с шагом в 5 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см (см. 5.4) относительно смеси
растворителей. Определяют длину волны в максимуме поглощения, регистрируя спектр вблизи него с
шагом в 1 нм.
Массовую концентрацию охратоксина А, рОТА, в мг/см3вычисляют по формуле
М
«100
к* 6
(D
где Атах — оптическая плотность в максимуме поглощения (при 333 нм);
М — относительная молекулярная масса охратоксина А (М = 403 г/моль);
к — относительный молярный коэффициент поглощения охратоксина А всмеси растворителей
(544 м2/моль);
б — толщина поглощающего слоя кварцевой кюветы, см.
4.18 Стандартный раствор охратоксина А
Разбавляют основной раствор (см. 4.17)смесью растворителя (см. 4.13)до получения стандартного
раствора с массовой концентрацией охратоксина А 4 мкг/см3.
Этот раствор может храниться в холодильнике при 4 °С. Его устойчивость должна проверяться.
4.19 Градуировочные растворы охратоксина А
Дозируют 5: 10. 25; 50:100 мкл аликвоты стандартного раствора (см. 4.18) в разные пробирки ем
костью от 4 до 5 см3(см. 5.16) с помощью шприцов с фиксированным объемом (см. 5.16). Выпаривают
досуха подтоком азота. Добавляют 1.0 см3подвижной фазы (см. 4.12) в каждую пробиркудля получения
массовых концентраций охратоксина А. составляющих 0.5; 1.0; 2.5; 5.0; 10.0 нг/25 мкл.
4.20 Раствор гипохлорита натрия, с (NaOCI) = 4 г/100 см3.
2