ГОСТ Р 57196—2016
поело внесения поправки, а также среднее значениедиаметра зоны контрольного раствора, вычислен
ное по всем 15 чашкам. На осиординат наносятсоответствующие концентрации растворов.
Градуировочным графиком пользуются в течение двух месяцев, периодически проверяя угол
наклона кривой подвум концентрациям на 3—5 чашках.
5.5.3 Проведение испытания
На каждую пробуиспытуемого препарата используют не менее 3 чашек.
Капельницей в трилунки каждой изчашеквносятрабочийстандартный раствор, ав три другие лун
ки — один из растворов испытуемого препарата. Объем вносимых растворов рабочего стандартного
раствора и испытуемого препаратадолжен бытьравным исоставлятьоколо0.1 см3.Чашки выдержива
ют втечение 16—18ч в термостате при температуре37 °С. затем измеряютдиаметр зон задержки роста
тест-культуры. При этом в расчет берутодну концентрацию, при которойдиаметр зоны роста тест-куль
туры в испытуемых образцах ближе кдиаметру зон задержки стандартногораствора.
5.5.4 Обработка результатов
Измеряют зоны задержки роста тест-культуры, образуемые контрольным раствором стандарта и
испытуемым раствором. Находят среднее арифметическое результатов диаметра зон задержки роста
по 3 чашкам. Вычитают разность значений диаметров зон задержки роста контрольной концентрации
стандартнойкривойиконтрольной концентрации виспытании. Этуразность прибавляютксреднемузна
чению диаметра зон задержки испытуемого раствора препарата, если она положительная, или
вычитают, еслиона отрицательная.
Затем по кривой находят концентрацию, соответствующую найденной величине зон. Умножая
полученную концентрацию на степень разбавления, получаютсодержание антибиотика в ЕД в 1см3.
1условная ЕД бацитрацина соответствует 1мкг антибиотика в товарном препарате.
Содержаниебацитрацина (Х4)в г в 1кгпрепарата определяют поформуле4:
*4 =
N *У
(4)
т7х103
где N — содержание бацитрацин в испытуемом растворе, мкг/см3:
V — объем соляной кислоты, используемойдля приготовления взвеси препарата, см3;
т7 — навеска препарата, г;
103— переводной коэффициент мкг/гв г/кг.
За результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных
определений, которые не должны отличаться от среднего значения болеечем на 10 % (отн.).
5.6Определение подлинности (идентичности)
Сущность метода заключается в хроматографическом разделении на бумаге бацитрацин на ком
поненты и проявлении хроматограммы нингидриновым красителем и биоавтографическим методом и
последующем сравнении полученной хроматограммы с хроматограммой стандартного образца бацит
рацин. проявленной аналогичным способом.
5.6.1 Аппаратура, материалы, реактивы, растворы
- Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104,1-гои 2-го классов точности с наиболь
шим пределом взвешивания 200 г,
- аппарат для встряхиванияжидкостей;
- камера или эксикатордля хроматографиидиаметром 28—32 см;
- электровентилятор бытовой по ГОСТ 7402 или электрофен бытовой по ГОСТ22314;
ИУС№03—1992(3],
- пипетка исполнения 8,2-го класса точности вместимостью 0,1 см3 по
ИУС№ 04—1992 [4];
- колбы конические вместимостью 100 см3 по ГОСТ25336;
- цилиндры мерные вместимостью 100 см3поГОСТ 1770;
- ступка фарфоровая по ГОСТ 9147;
- бумага хроматографическаяпо (3];
- мензурки стеклянные вместимостью 50 см3по ГОСТ 1770;
- воронкидиаметром 36.56 мм. высотой 80 мм по ГОСТ25336,
- циркуль по ГОСТ28950;
- ножницы по ГОСТ21239;
9