ГОСТ 13496.21— 2015
8.3.8 Приготовление основного раствора лизина массовой концентрации 2,5 мг/см3
В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают (156.0 ± 0,5) мг L-лизина моногидрохлорида,
добавляют раствор соляной кислоты (см. 8.3.2), после полного растворения доводят объем до метки
тем же раствором соляной кислоты.
Срокхранения раствора вхолодильнике при температуре от 2 °С до 8 °С — не более 4 мес.
8.3.9 Приготовление основного раствора триптофана массовой концентрации 2,5 мг/см3
В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают (125,0 ♦0,5) мг триптофана, добавляют раствор
изопропилового спирта (см. 8.3.6). после полного растворения доводят объем до метки тем же раство
ром изопропилового спирта.
Срокхранения раствора вхолодильнике при температуре от 2 °Сдо 8 °С — не более 4 мес.
8.3.10 Приготовление растворов сравнения лизина и триптофана
Для каждой определяемой аминокислоты готовят раствор сравнения с массовой концентрацией,
зависящей от предполагаемой массовой доли лизина или триптофана в анализируемой пробе. Раство
ры сравнения аминокислот готовят из их основных растворов (см. 8.3.8. 8.3.9) разведением буферным
раствором (см. 8.3.4)для лизина и раствором изопропилового спирта (см. 8.3.6)для триптофана.
Растворы готовят вдень проведения испытаний.
8.4 Подготовка аминокислотного анализатора
Аминокислотный анализатор готовят к работе в соответствии с инструкцией (руководством) к
прибору.
8.5 Проведение испытания
8.5.1 Проведение кислотного гидролиза анализируемой пробы для определения массовой
доли лизина
8.5.1.1 Навеску пробы массой (100.0
L
0,5) мг аккуратно помещают на дно виалы для гидролиза,
добавляют две-три капли этилового спирта и добавляют 10 см3 раствора соляной кислоты молярной
концентрации 6 моль/дм3 (см. 8.3.1). Виалу для гидролиза герметично закрывают завинчивающейся
крышкой и помещают в предварительно нагретый до температуры 110 °С сушильный шкаф на 24 ч.
После завершения гидролиза виалу охлаждают до комнатной температуры, взбалтывают и фильтруют
содержимое через фильтр «синяя лента», отбросив первые порции.
П р и м е ч а н и е — Для уменьшения времени гидролиза допускается проводить гидролиз в автоклаве при
давлении 0,25 МПа и температуре 137 “С в течение 3ч.
8.5.1.2 2 см3фильтрата выпариваютдосуха на устройстве для выпаривания, остаток растворяют
в 10 см3 буферного раствора (см. 8.3.3) или добавляют 5 см3 нейтрализующего раствора (см. 8.3.4)
и перемешивают.
П р и м е ч а н и е — При отсутствии устройства для выпаривания допускается проводить выпаривание
фильтрата на водяной бане.
8.5.2 Проведение щелочного гидролиза анализируемой пробы для определения массовой
доли триптофана
8.5.2.1 Навеску пробы массой (200.0 i0,5) мг аккуратно помещают на дно виалы для гидролиза,
добавляют две-три капли этилового спирта. 1.6 г свежерастертой в фарфоровой ступке гидроокиси
бария и содержимое тщательно перемешивают. Затем приливают 3 см3дистиллированной воды. Виалу
для гидролиза герметично закрывают завинчивающейся крышкой и помещают в предварительно нагре
тыйдо температуры 110 °Ссушильный шкаф на 18ч. По окончании гидролиза виалу тщательно встряхи
вают. охлаждают до комнатной температуры и помещают в холодильник на 1,5— 2 ч для осаждения
ионов бария.
8.5.2.2 Методом обратного фильтрования отбирают 1 см3надосадочной жидкости и добавляют
1см3растворауглекислого натрия(см. 8.3.7)для осажденияоставшегося бария. Пробиркус полученным
раствором закрывают пробкой и хранят в холодильнике.
Перед проведением хроматографии температуру гидролизата доводят до комнатной.
8.5.2.3 Перед нанесением на хроматографическую колонку аликвотную часть гидролизата
подкисляют концентрированной соляной кислотойдо 2,2ед. pH и приливают объем буферного раствора
5