ГОСТ 13496.21— 2015
9.3.6 Приготовление кадмисво-нингидринового реактива
Смешивают 50 см3 раствора нингидрина (см. 9.3.4) и 10 см3 раствора уксуснокислого кадмия
(см. 9.3.5).
Раствор готовят непосредственно перед испытанием.
9.3.7 Приготовление раствора углекислого натрия с массовой долей 10 %
Раствор углекислого натрия с массовой долей 10 % готовят по 8.3.7.
9.3.8 Приготовление раствора изопропилового спирта
Раствор изопропилового спирта готовят по 9.3.9.
9.3.9 Приготовление основных растворов лизина и триптофана
Основные растворы лизина готовят по 8.3.6, триптофана — по 8.3.7.
9.3.10 Приготовление градуировочных растворов лизина и триптофана
Для каждой определяемой аминокислоты готовят по три градуировочных раствора с массовыми
концентрациями, зависящими от массовых долей лизина и триптофана анализируемых проб. Градуиро-
вочные растворы аминокислот готовят из основных растворов разведением буферным раствором с
2,2 ед. pH (см. 9.3.3)для лизина и раствором изопропилового спирта (см. 9.3.8)для триптофана.
Растворы готовят вдень проведения испытаний.
9.4 Подготовка кхроматографированию
9.4.1 Уравновешивание хроматографической пластинки
Хроматографическую пластинку обратной стороной накладывают на стеклянную пластинку,
накрывают двумя слоями фильтровальной бумаги размером 20 х 30 см. Перегнув выступающий конец
фильтровальной бумагичерез верхний край стеклянной пластинки, закрепляют его резиновым кольцом.
Стопку пластинокот 3до 5 шт. помещают в камеру для хроматографирования, в которую предвари
тельно наливают буферный раствор с 3.28 ед. pH (см. 9.3.3) слоем 1,0— 1.5 см. Нижний край пластинок
должен быть погружен в раствор на 1.0 см. Пластинки выдерживают в закрытой камере в течение суток
при комнатной температуре, затем удаляют фильтровальную бумагу и высушивают на воздухе.
Пластинки хранят в темном месте не более 1 мес.
9.4.2 Подготовка пластинок кхроматографированию
С краев уравновешенных пластиноксчищают ионообменный слой смолы шириной 3 ммдля более
равномерного продвижения буферного раствора. На расстоянии 2 см от нижнего края пластинки
простым карандашом проводят две линии с расстоянием между ними не более 1 мм (линия старта). На
линии старта размечают 12 полосокдлиной 1,0смс расстоянием между ними 0.5 см. Каждую полоску
ограничивают вертикальными бороздками (бороздки проводят острым предметом) для предотвра
щения расплывания пятен в ширину при хроматографировании.
9.4.3 Подготовка каморы для хроматографии
Хроматографическую камеру предварительно насыщают буферным раствором с 3.3 ед. pH
(см. 8.3.3) — для определения лизина, с 6.0 ед. pH — для определения триптофана.
Для этого стенки камеры выстилают одним слоем фильтровальной бумаги и на дно наливают
используемый буферный раствор слоем 1,5 см. Герметично закрытую камеру помещают в термостат,
предварительно прогретый до температуры 60 еС для лизина и до температуры 30 5С для триптофана, на
15— 20 мин до полного пропитывания бумаги.
9.4.4 Подготовка микрошприца
Из микрошприца удаляют шток, на верхний конец стеклянного цилиндра надевают резиновую
трубкудлиной 30 мм. Конец иглы микрошприца обрезают перпендикулярно ее длине на уровне полови
ны скоса и срез зашлифовывают во избежание повреждения слоя смолы при нанесении растворов.
9.5 Проведение испытания
9.5.1 Проведение кислотного гидролиза анализируемой пробы для определения массовой
доли лизина
9.5.1.1 Кислотный гидролиз анализируемой пробы проводят по 8.5.1.1.
9.5.1.2 2 см3фильтрата выпаривают досуха на устройстве для выпаривания, осадок растворяют
в 5 см3 буферного раствора с 2,2 ед. pH (см. 9.3.3).
П р и м е ч а н и е — При отсутствии устройства для выпаривания допускается проводить выверивание
фильтрата на водяной бане.
9