ГОСТ 13496.21— 2015
По окончании гидролиза пробирку с раствором тщательно встряхивают, охлаждаютдо комнатной
температуры и помещают в морозильную камеру холодильника на 20— 30 мин. Охлажденный гидроли
зат быстро нейтрализуют, приливая в пробирку 0.8 см1раствора соляной кислоты (см. 10.3.5). которую
также предварительно охлаждают в морозильной камере. Доводят объем раствора дистиллированной
водой до 50 см3. Пробирку завинчивают крышкой, раствор перемешивают и центрифугируют в течение 5
мин счастотой вращения 3000 об/мин. Пипеткойосторожно над осадком отбирают 2,0см3гидролизата,
переносят в центрифужную пробирку, добавляют 5.0 см3 раствора л-диметиламинобензальдегида
(см. 9.3.2) и перемешивают. Через 25 мим в пробирку приливают 0.2 см3 раствора нитрита натрия (см.
10.3.1). перемешивают и центрифугируют в течение 3 мин с частотой вращения 3000 об/мин.
Через 10 мин раствор фотометрируютна фотоэлектроколориметре с красным светофильтром при
длине волны 650 нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 5 мм относительно первого градуи
ровочного раствора.
П р и м е ч а н и е — Для проб с высокой массовой долей триптофана допускается разведение гидролизатов
первым градуировочным раствором, приготовленным по 10.3.4. с дальнейшим его учетом в формуле (5).
Для определения потерьтриптофана и установления коэффициента его разрушения параллельно
проводят гидролиз абсолютно сухого казеина массой (0.050 л 0.001)гвтрехкратной повторности, где для
окрашивания вместо 2 см3гидролизата анализируемой пробы берут 1 см3 гидролизата казеина.
Коэффициент разрушения триптофана К при гидролизе вычисляют по формуле
_
К =
4
W
-С
Q
,
(6)
где 17.0 — теоретическая массовая доля триптофана в казеине по Гаммерстену, г/кг;
4 — коэффициент.
С2— среднеарифметическое значение массовой доли триптофана в пробах казеина, найденное
по градуировочному графику, г/кг.
10.6 Обработка результатов
Массовую долю триптофана
X,
% , вычисляют по формуле
iooo
К Cj-100
’
(7)
где К — коэффициент разрушения триптофана по формуле (6);
С3— массовая концентрация триптофана в пробе, найденная по градуировочному графику с учетом
разведения, г/кг;
100 — коэффициент перевода результата в проценты;
1000 — коэффициент согласования единиц массы.
Вычисления проводят до третьего десятичного знака с последующим округлением до второго
десятичного знака.
За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух
параллельных испытаний, выполненных в условиях повторяемости и удовлетворяющих условию
приемлемости 11.2.
11 Контроль точности результатов испытаний
11.1 Контроль точности результатов испытаний должен соответствовать ГО СТ ИСО 5725-1,
ГО СТ ИСО 5725-2 и ГО СТ ИСО 5725-6.
11.2 Приемлемость результатов испытаний, полученных в условиях повторяемости
(сходимости)
Абсолютное расхождение между результатами двух отдельных испытаний, полученными одним
и тем же методом, на одной лабораторной пробе, в одной и той же лаборатории, одним и тем же
оператором, на одном и том жеэкземпляре оборудования в течение короткого промежутка времени
при доверительной вероятности Р = 0,95. не должно превышать предела повторяемости
(сходимости) г. относительная величина которого приведена в таблице 3.
13