ГОСТ 13496.21— 2015
Высушенные кристаллы хранят в емкости из темного стекла с притертой крышкой до изменения
внешних характеристик.
10.3.2.2В мерной колбе вместимостью 1000 см3 растворяют 5.0 г пврекристаллизованного
л-диметиламинобенэальдегида в концентрированной соляной кислоте и доводят объем раствора до
метки той же кислотой.
Срок хранения раствора в емкости изтемного стекла с притертой крышкой — 1мес.
10.3.3 Раствор соляной кислоты молярной концентрации с(НС1) = 6 моль/дм3 готовят по 8.3.1.
10.3.4 Приготовление основного раствора триптофана массовой концентрации 1 мг/см3
В мерную колбу вместимостью 100 см3вносят (100.0 ± 0.5) мг триптофана, добавляют 50— 70 см3
дистиллированной воды и перемешивают. При необходимости нагревают на водяной бане с темпера
турой не более 80 °С, после полного растворения и охлаждения доводят до метки дистиллированной
водой.
Срок хранения раствора в холодильнике при температуре от 2 °Сдо 8 °С — не более 2 мес.
10.3.5 Приготовление градуировочных растворов
В девять мерных колб вместимостью 50 см3последовательно вносят основной раствор трипто
фана (см. 10.3.4) в объемах, указанных в таблице 2. Объемы растворов доводят до метки дистилли
рованной водой и тщательно перемешивают.
Т а б л и ц а 2
Номер градуировочною раствора
Наименование показателя
1
2345
6
7
89
Объем основного раствора триптофана, см30
1.01.52.02.5
3.03.54.04.5
Массовая концентрация триптофана в градуи
ровочных растворах в пересчете на массовую долю
триптофана в анализируемой пробе, г/кг0
1.01.52.02.5
3.03.54.04.5
Срок хранения градуировочных растворов в холодильнике при температуре от 2 °С до
8
°С —
не более 2 нед.
10.4 Построение градуировочного графика
Пипеткой отбирают по 2 см3 каждого градуировочного раствора и переносят в центрифужные
пробирки. Затем в каждую пробирку добавляют по 5 см3 раствора л-диметиламинобензальдегида
(см. 10.3.2). перемешивают. Через 25 мин приливают по 0.2 см3раствора нитрита натрия (см. 10.3.1),
перемешивают и центрифугируют в течение 3 мин с частотой вращения 3000 об/мин. Через 10 мин
растворы фотометрируют на фотоэлектроколориметре с красным светофильтром при длине волны
650 нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 5 мм относительно первого градуировочного
раствора.
Строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс массовую концентрацию триптофана
в градуировочных растворах в пересчете на массовую долю триптофана в анализируемой пробе,
в граммах на 1 кг, а по оси ординат — соответствующую величину оптической плотности.
Для построения каждой точки градуировочного графика вычисляют среднеарифметическое
значение оптической плотности результатов двух измерений каждого градуировочного раствора.
Градуировочный график проверяют по трем градуировочным растворам в том интервале,
в котором проводят испытания.
Градуировку признают стабильной, если отклонение найденной массовой доли триптофана от
заданного значения не превышает 5 %. В противном случав анализируют градуировочный раствор еще
два раза. При повторных отклонениях, превышающих указанный норматив хотя бы один раз. градуи
ровку проводят заново, начиная с приготовления нового основного раствора (см. 10.3.3).
10.5 Проведение испытания
Навеску массой (100.0 ±0.5) мгаккуратно переносят на дно тефлоновой пробирки, добавляют 0.8 г
свежерастертой гидроокиси бария и содержимое тщательно перемешивают. Затем приливают 1.5 см3
дистиллированной воды. Пробирку герметично закрывают завинчивающейся крышкой и аккуратно
встряхивают для равномерного смачивания и перемешивания содержимого. Пробирку устанавливают
вертикально в штатив и помещают впредварительно нагретыйдо температуры 110 °С сушильный шкаф
на 18ч.
12