ГОСТ Р 56919—2016
Т а б л и ц а 1— Примеры результатов испытаний ПЦР-наборов по характеристикам специфичности
Вариант
результата
Наименование
набора
Шифрованные
положительные
образцы
Шифрованные
отрицательные
образцы
Интерпретации результатов
X1Х2хзХ4
Х5Х6
Вариант 1
ПЦР-набор+а+
+
_ б
Тест-ПЦР-набор
+4*+
—
— —
Положительный, ПЦР-набор соответ-
ствует заявленной характеристике специ
—
-
фичности для определения «X*» таксона
Вариант 2
ПЦР-набор
б
Тест-ПЦР-набор++
♦
—
Отрицательный, ПЦР-набор не соотвег-
ствует заявленной характеристике специ
——фичности для определения «X*» таксона
Вариант 3
ПЦР-набор+—
+
—
——
Недостаточен для принятия решения®
Тест-ПЦР-набор+
+4
—
——
Вариант 4
ПЦР-набор
—
+
—
—
—
—
Недостаточен для принятия решения®
Тест-ПЦР-набор+■f4
—
—
—
а « — » ПЦР-лродукт обнаружен и era размер соответствуетожидаемому и полученному с Тест-ПЦР-набором.
6в — » ПЦР-продукт не обнаружен или его размер не соответствует ожидаемому и полученному с Тест-ПЦР-
набором.
" « — » Процедура испытаниядолжна быть повторена.
* Указывают таксономическую принадлежность анализируемого образца.
При меч ани е — Интерпретация результатов испытаний основана на сопоставленииданных, полученных
с использованием испытуемого ПЦР-набора и соответствующегоему Тест-ПЦР-наборз.
Протокол испытаний оформляют в соответствии с ГОСТ Р 53214, ондолжен содержать результаты,
рассчитанные в соответствии с таблицей 1.
7.3Для подтверждения соответствия ПЦР-наборов заявленным характеристикам чувствительно
сти проводят их испытания с использованием Тест-ПЦР-набора.
7.3.1 Шифрованные положительные и отрицательныеобразцыдля подтверждения чувствительно
сти ПЦР-наборов формируются заказчиком испытаний ПЦР-набора и включают шифрованные положи
тельные образцы (в количестве не менее шести), которые составляют генно-инженерную конструкцию,
содержащую фрагментДНК целевого таксона, в различных концентрациях (используемыо концентрации
фрагмента ДНК целевого таксона рассчитывают таким образом, чтобы соответствовать заявленной чув
ствительности ПЦР-набора. например от 0,1 мкг до 10 пг специфической ДНК).
С целью исключения ложноотрицательных результатов в тестирование ПЦР-наборов может быть
включен внутренний контрольный образец, в качестве которогоиспользуют ДНК фага лямбда, праймеры и
условия амплификации, предложенные фирмой Perkin Elmer Cetus (США) в наборе GeneAmp kit.
7.3.2 Вид испытаний (внутрилабораторные или межлабораторные) определяется заказчиком.
7.3.3 Оценку характеристик специфичности ПЦР-наборов проводят по результатам их испытаний.
73.4 Результаты испытаний по характеристикам чувствительности определяют путем сопо
ставления данных, полученных с использованием испытуемого ПЦР-набора и соответствующего ему
Тест-ПЦР-набора в течение одного интервала времени на идентичных анализируемых пробах в одной и
той же лаборатории одним и тем же оператором, использующим оборудование и схему проведения
идентификации соответствующего ПЦР-набора, указанных в инструкции к ПЦР-набору.
73.5 Результаты испытаний должны ясно констатировать обнаружение нуклеотидной последова
тельности целевого таксона: необходимо выявить полное соответствие размеров амплифицируемых
фрагментов целевого таксона и яркости их сигнала после разделения электрофоретическим методом,
полученных с использованием испытуемого ПЦР-набора и соответствующего ему Тест-ПЦР-набора.
П р и м е ч а н и е — Соответствие размеров амплифицируемых фрагментов целевого таксона, полученных
с использованием испытуемого ПЦР-набора и соответствующего ему Тест-ПЦР-набора. определяют путем приме
нения маркеров молекулярных масс ДНК. которые включают фрагмент ДНК. имеющий размер, соответствующий
размеру амплицифированного фрагмента целевого таксона. Соответствие яркости сигнала амплифицируемых
4