ГОСТ 33641-2015
разделения компонентов осадка и ресуспендирования мелких частиц во время добавления испытуе
мой воды в водную колонку осадок покрывают пластиковым диском и воду выливают на него, и после
этого диск сразу же удаляют. Подходят также другие устройства.
9.1.2 Подготовка системы вода-осадок (обогащенный осадок)
9.1.2.1 Обогащенные осадки, приготовленные согласно 7.6. помещают в сосуды и кристалли
зационную чашку, и добавляют надосадочную жидкость с получением объемного соотношения оса
док-вода 1:4. Высота слоя осадка должна находиться в пределах от 1.5 до 3 см (для кристаллизаци
онной чашки он может быть немного ниже). Для предупреждения разделения компонентов осадка и
ресуспендирования мелких частиц во время добавления испытуемой воды в водную колонку осадок
покрывают пластиковым диском и воду выливают на него, и после этого диск сразу же удаляют. Под
ходят также другие устройства. После приготовления обогащенного осадка с надосадочной водой
требуется обеспечить проникновение испытуемого вещества из осадка в водную фазу [5]. (6). [8]. [18].
Предпочтительно это проводят в условиях температуры и аэрации, используемых в испытании. Соот
ветствующее время уравновешивания является специфическим для осадка и химического вещества и
может находиться в пределах от нескольких часов до суток, а в редких случаях до пяти недель. По
скольку за это время может произойти деградация многих химических веществ, то не ожидают окон
чания уравновешивания, но рекомендуемый период уравновешивания составляет 48 ч. Если период
полураспада в осадке является большим (см. 4.1). то период уравновешивания увеличивают. В конце
этого дополнительного периода уравновешивания определяют концентрацию испытуемого вещества в
надосадочной жидкости, поровой воде и осадке по меньшей мере при самой высокой концентрации и
при одной более низкой концентрации (см. 9.3.1.1). Данные аналитические измерения испытуемого
вещества позволяют рассчитать массовый баланс и выразить результаты на основе установленных
концентраций.
9.1.2.2 Испытуемые сосуды покрывают (например, стеклянными пластинками). Если необходимо,
то во время испытания уровень воды доводят до первоначального объема для компенсации потери
воды за счет испарения. Для предупреждения отложения солей используют дистиллированную или
деионизированную воду. Кристаллизационные чашки в камерах для культивирования не покрывают,
и необязательнодоводить объем для компенсации потери воды во время периода испытания,
поскольку тяжи яиц контактируют с водой в течение примерно суток и чашки используют только во время
короткой фазы испытания.
9.1.3 Внесение тестовых организмов
9.1.3.1 За 4-5 сут личинок первой стадии развития для получения 1-го поколения кладки яиц от
бирают из культур и помещают в небольшие сосуды с культуральной средой. Используют выдержанную
среду из исходной культуры или свежеприготовленную среду. В любом случае в культуральную среду
добавляют небольшое количество корма, например зеленые водоросли и/или несколько капель филь
трата мелко измельченной суспензии хлопьевидного корма для рыб (см. приложение А). Используют
только недавно отложенные кладки яиц. Обычно личинки начинают вылупляться через 2 сут после
кладки (2-3 сут для Chironomus riparius при температуре 20 °С и 1-4 сутдля Chironomusdilutus при тем
пературе 23 аС и Chironomus yoshimatuiпри температуре 25 вС), и рост личинок происходит в четыре
стадии развития, каждая продолжительностью 4-8 сут. В испытании используют личинок первой ста
дии развития (не более 48 ч после кладки). Стадию развития личинок определяют по ширине головной
капсулы [8].
9.1.3.2 В каждый испытуемый сосуд, содержащий систему осадок-вода, произвольно вносят 20 ли
чинок первой стадии развития 1-го поколения, используя пипетку с тупым кончиком. Аэрацию воды
останавливают во время внесения личинок в испытуемые сосуды и еще на 24 ч после этого (см. 9.1.6.1).
Согласно выбранному дизайну испытания (см. 8.1.2 и 8.2.1) число используемых личинок на каждую
концентрацию составляет не менее 120 (6 повторностей на каждую концентрацию) при установлении
ЕСХи 160 при установлении NOEC (8 повторностей на каждую концентрацию). В дизайне с обогащен ным
осадком воздействие начинают с внесения личинок.
9.1.4 Обогащение надосадочной жидкости
Через 24 ч после внесения личинок первой стадии развития 1-го поколения в надосадочную во
дную колонку добавляют испытуемое вещество и вновь проводят легкую аэрацию (возможные поправ ки
к протоколу испытания приведены в 3.1). Небольшие объемы растворов испытуемого вещества вно сят
пипеткой ниже поверхности воды. Затем надосадочную воду осторожно перемешивают, не нарушая осадок.
В протоколе с обогащенной водой воздействие начинают с обогащения воды (т. е. через одни сутки после
внесения личинок).
6