ГОСТ 33641-2015
экстраполяции значительно ниже самой низкой действующей концентрации или выше самой высокой
концентрации. Предварительное испытание для определения диапазона предельных концентраций
согласно стандартам ОЕСР 218 или 219 проводят для выбора подходящего диапазона испытуемых
концентраций.
8.1.2 Для установления ЕСХтребуется не менее пяти концентраций в восьми повторностях для
каждой концентрации. Для каждой концентрации используют две камеры для культивирования А и Б
(см. документ OECD, Test No. 233:2010). Восемь повторностей разделяют на две группы по четыре
повторности для каждой камеры для культивирования. Такое число повторностей требуется с учетом
количества комаров, необходимого в камере для оценки воспроизведения звуковых сигналов. Однако
для 2-го поколения также требуется восемь повторностей из подвергшихся воздействию популяций в
камерах для культивирования. Интервал между концентрациями не должен быть больше двух (исклю
чение может быть сделано для случаев, если кривая концентрация-эффект имеет пологий наклон). Ко
личество повторностей для каждой обработки может быть уменьшено до шести (три на каждую камеру
для культивирования), если количество испытуемых концентраций с различным эффектом является
большим. Увеличение количества повторностей или уменьшение диапазона испытуемых концентраций
приводит к более узким доверительным интервалам для значений ЕСХ.
8.2 Дизайн для установления NOEC
Для установления NOEC используют пять испытуемых концентраций как минимум в восьми по
вторностях (4 на каждую камеру для культивирования, указанные в приложениях А и Б (см. документ
OECD. Test No. 233:2010)), и интервал между концентрациями не должен быть больше двух. Количе
ство повторностей должно быть достаточным для обеспечения адекватной статистической мощности
для выявления разницы в размере 20 % контроля на 5%-ном уровне значимости (р = 0,05). Для опре
деления скорости развития, плодовитости и фертильности обычно необходим дисперсионный анализ
(ANOVA) с послодующим применением критерия Даннетта или критерия Вильямса [22}-(25]. Для опре
деления показателя вылулления и соотношения полов подходят критерий Кохрана — Армитажа. точ
ный критерий Фишера (с поправкой Бонферрони) или критерий Ментеля — Хензеля.
8.3 Определение диапазона предельных концентраций
Определение диапазона предельных концентраций выполняют (одна испытуемая концентрация и
контроль), если никакие эффекты не были выявлены в предварительном устанавливающем диапазон
испытании, включая максимальную концентрацию. Целью определения диапазона предельных кон
центраций является установление того, что токсическая концентрация испытуемого вещества выше,
чем испытуемая предельная концентрация. Предлагается для воды 100 мг/л и для осадка 1000 мг/кг
(сухая масса). Используют не менее восьми повторностей на каждую обработку и контроль. Должна
быть показана адекватная статистическая мощностьдля выявления разницы в размере 20 % контроля
при 5%-ном уровне значимости (р = 0,05). Для данных по метрическому эффекту (например, скорость
развития) установление t-критерия является подходящим статистическим методом, если данные от
вечают требованиям данного критерия (нормальное распределение, однородность дисперсии). Если
указанные требования не выполняются, то используют /-критерий с различными дисперсиями или не
параметрический критерий, такой как критерий Вилкоксона — Манна — Уитни. Для данных по показа
телю вылулления подходит точный критерий Фишера.
9 Проведение испытания
9.1 Условия испытания
9.1.1 Подготовка системы вода-осадок (обогащение воды)
Искусственный осадок (см. 7.3.1-7.3.2 и приложение Б) вносят в каждый испытуемый сосуд и кри
сталлизационную чашку с получением слоя высотой не менее 1,5 см (для кристаллизационной чашки он
может быть немного ниже), но максимально 3 см. Добавляют воду (см. 7.4.1) таким образом, чтобы
соотношение высоты слоя осадка и высоты воды не превышало 1:4. После приготовления испытуемых
сосудов систему осадок-вода оставляют при легкой аэрации в течение 7 сут перед добавлением личи нок
первой стадии развития 1-го и 2-го поколений (см. 7.3.2 и приложение Б). Система осадок-вода в
кристаллизационных чашках не подвергается аэрации во время испытания, поскольку в них не поддер
живается выживаемость личинок (тяжи яиц были извлечены до вылулления). Для предупреждения
5