ГОСТ 33504—2015
Колбы вместимостью 25. 50.100. 1000 см32-го класса точности по ГОСТ 1770.
Дозаторы медицинские лабораторные по ГОСТ 28311.
Фильтр мембранный с размером пор 0.45 мкм.
Шкаф сушильный, обеспечивающий поддержание заданного режима температуры от 20 °С до
200 °С с погрешностью
±
2 °С.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Ацетонитрил для ВЭЖХ.
Кислота фосфорная концентрированная по ГОСТ 6552.
Стандартный образец состава гИЗИ-дигидрокверцетина -2R3R-flrK МСО 1743 или
аналогичный МСО с аттестованным значением СО от 99.59 % до 100 %. при Р = 0.95. погрешность
аттестованного значения равна 0.05 %.
Допускаетсяприменениедругихсредствизмерения,посудысметрологическими
характеристиками и вспомогательного оборудования с техническими характеристиками не хуже, а
также реактивов и материалов по качеству не ниже вышеуказанных.
7.5.3 Отбор проб - по 7.1.
7.5.4 Условия проведения анализа
Режим ВЭЖХ анализа - изократический.
Подвижная фаза - ацетонитрил - кислота фосфорная 0.5 % (15 : 85) (об./об.).
Скорость потока подвижной фазы - 0.5 см3/мин.
Длина волны - 290 нм.
Температура - 20 °С.
Объем вводимой пробы - 0.02 см3.
Время анализа - 60 мин.
7.5.5 Подготовка к анализу
7.5.5.1 Приготовление раствора стандартного образца
СО 2R3R изомера дигидрокверцетина массой 20.0 мг, взвешенный с точностью до 0.2 мг,
предварительно высушенный в сушильном шкафу в течение 60 мин при температуре 105°С,
помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, прибавляют 60 см3 подвижной фазы и помещают в
ультразвуковую баню до полного растворения. После охлаждения раствора до температуры 20 °С
объем содержимого колбы доводят до метки подвижной фазой, перемешивают и фильтруют через
фильтр с размером пор 0.45 мкм. отбрасывая первые 5 см3 фильтрата. Полученный фильтрат
является раствором стандартного образца.
7.5.5.2 Приготовление раствора анализируемой пробы
Анализируемую пробу массой 50.0 мг. взвешенную с точностью до 0.2 мг, предварительно
высушенную в сушильном шкафу в течение 60 мин при температуре 105°С, помещают в мерную
колбу вместимостью 50 см3, прибавляют 30 см3подвижной фазы и помещают в ультразвуковую баню до
полного растворения. После охлаждения раствора до температуры 20 °С объем содержимого колбы
доводят до метки подвижной фазой, перемешивают и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45
мкм. отбрасывая первые 5 см3 фильтрата. 5 см3полученного фильтрата помещают в мерную колбу
вместимостью 25 см3, доводят объем содержимого колбы до метки подвижной фазой и
перемешивают.
7.5.5.3 Приготовление раствора подвижной фазы для ВЭЖХ
Для приготовления подвижной фазы смешивают 15 объемов ацетонитрила и 85 объемов 0.5 %
фосфорной кислоты.
Приготовление 0.5 % фосфорной кислоты: в мерную колбу вместимостью 1000 см3 вносят
500 см3 дистиллированной воды и 5 см3фосфорной кислоты, доводят объемколбы
дистиллированной водой до метки и перемешивают.
7.5.6 Проведение анализа
Последовательно вводят в прибор по 0.02 см3 растворов стандартного образца и
анализируемой пробы, дожидаются окончания анализа.
12