ГОСТ ISO 9167-1—2015
где А» — разница между оптической плотностью при равновесии десульфированного синигрина и
оптической плотности при t=0:
I— длина оптического пути ячейки, см (т. е. 1 см);
с — концентрация десульфированного синигрина при равновесии, моль/ дм3, т. е.
0,15*10-3 0,95-2
С =
2,05
= 0.139 моль/дм3,
где 0.95 — выход десульфированного синигрина при равновесии.
В качестве альтернативы, активность сульфатазы может быть рассчитана с использованием
следующей упрощенной формулы
AA-5J
A
t- Ае
4.8.4 Разведение сульфатазы
Используя пипетку, переносят 1 см3 очищенной сульфатазы (см. 4.8.2) в мерную колбу на
10 см3.Доводят объем водой до метки и перемешивают.
Раствор делят на небольшие порции и хранят в морозильной камере, в термоустойчивой колбе
при температуре минус 18 ’С.
5 Оборудование
Используют обычное лабораторное оборудование, в частности следующее.
5.1 Хроматограф для ВЭЖХ, обеспечивающий проведение градиентного элюирования с воз
можностью термостатирования колонки на уровне 30 ’С с ультрафиолетовым детектором, позволяю
щим проводить измерения при длине волны 229 нм.
5.2 Хроматографическая колонка для ВЭЖХ. заполненная сорбентом типа Cie или Се с разме
ром частиц меньше или равным 5 мкм, например11:
Lichrosorb RP18 колонка. < 5 мкм (150 мм •4.6 мм)
Spherisorb ODS2 колонка. < 5 мкм (250 мм 4 мм: 250 мм •5 мм)
Novapak С18 колонка. 4 мкм (150 мм •4 мм)
Lichrospher RP8 колонка. < 5 мкм (125 мм ■4 мм)
NucleosilCI8 колонка < 5 мкм (200 мм •4 мм)
Эффективность работы колонки должна регулярно проверяться, предпочтительно с применени
ем контрольного образца десульфоглюкозинолата рапса21. В частности, колонки не должны разру
шать 4-гидроксиглюкобрассицин. который является важным, но относительно нестабильным, глюко-
зинолатом.
Для получения сопоставимых результатов, новые колонки должны быть кондиционированы в
соответствии с инструкциями изготовителя.
5.3 Двухлучевой спектрофотометр, предназначенный для работы в ультрафиолетовой области
спектра, с контролем температуры на уровне 30 ’С. снабженный кварцевыми кюветами с длиной оп
тического пути 1см и регистрирующей системой.
5.4 Микромельница, например кофемолка.
*>Примеры коммерчески доступных продуктов. Данная информация приведена для удобства пользования
настоящим стандартом и не означает рекламу данных продуктов.
2> Контрольный образец десульфоглюкозинолата рапса может быть получен из Community Reference
Bureau
4