ГОСТ РИСО 16256—2015
Введение
Испытания чувствительности in vitro проводятся на микроорганизмах, предположительно являю
щихсяпричинойзаболевания, особенноеслиорганизм относятквидам, которые могутпроявлятьрезис
тентность к часто используемым антимикробным препаратам. Данные исследования также важны для
контроля над резистентностью, в эпидемиологических исследованиях чувствительности и при сравне
нии новых исуществующих препаратов.
Процедуры разведения используются для определения минимальных подавляющих концентра
ций (МПК) антимикробных препаратов и представляют собой референтный метод испытания чувстви
тельности микроорганизмов к антимикотическим препаратам.
Методы МПК используются:
- для наблюдения надрезистентностью.
- при сравнительных испытаниях новых препаратов для исследовательских и регистрационных
целей:
- для определения чувствительности организмов, которые в рутинных тестах показывают сомни
тельные результаты;
- для испытаний наорганизмах, для которыхрутинные тесты могут быть ненадежными, ив случае,
когдадля клинической практики необходим количественный результат.
В методах разведений микроорганизмы проверяются на способность к видимому росту на ряде
агаризованных сред (разведение в агаре) или в бульоне (разведение в бульоне), содержащих последо
вательные разведения антимикробного препарата.
Наименьшую концентрацию антимикробного препарата (в мг/л). которая при определенных усло
виях испытаний in vitro подавляет видимый или оптически измеримый рост микроорганизмов в течение
определенного промежутка времени, называют МПК.
МПКслужит руководством дляопределениячувствительности организма кантимикробным препа
ратам для практикующего врача и помогает в принятии решения о проведении лечения. Необходимы
тщательный контроль и стандартизация внутри- и межлабораторной воспроизводимости, поскольку
результатв значительной степени зависитот методов испытания.
Общепринято, чтопри анализе МПКв бульонных тестах, воспроизводимых в пределахединствен
ного двукратного разведения, результат достоверен (т. е. ± 1 лунка или пробирка в серии двукратных
разведений).
Разведение в бульоне — техника, при которой емкости, содержащие идентичные объемы раство
ровбульонасантимикробиыми препаратамив постепенновозрастающихконцентрациях(как правило, в
два раза), инокулированы известным количеством микроорганизмов.
Микроразведение в бульоне — тестирование в бульоне, выполняемоев планшетахдля микрораз
ведения.
Референтные методы настоящегостандарта предназначены для испытанийчистыхкультурдрож жевых
грибов. Методы микроразведения в бульоне, описанные в настоящем стандарте, по существу
аналогичны методам Clinical and Laboratory Standards Institute (Института клинических и лабораторных
Стандартов) (CLSI)[1] и методам European Committeeon Antimicrobial SusceptibilityTesting (Европейско
го комитета по вопросам исследования Чувствительности кАнтимикробным препаратам) (EUCAST) [2].
Настоящими методами былапоказана схожесть, вплотьдо идентичности, вопределениизначений
МПКдляфлуконазоладо 2 мг/л(3].Исследованияснекоторымидругимиантимикотическимипрепарата
ми запланированы или находятсяв процессеподготовки. Лаборатории, желающиеиспользоватьнасто
ящийстандартдля проведения исследований новейшихантимикотических препаратов, либо в качестве
референтного метода для сопоставления МПК. проводимого с помощью диагностических приборов,
должны выбрать процедуры испытания, основываясь на варианте прочтения МПК. установленного
путем визуального анализа (CLSI метод) или при использовании спектрофотометра (EUCAST метод).
В обоих случаяхдолжны в точности соблюдаться процедурныедеталидля выбранного параметра.
IV