ГОСТ Р 52613—2006
4 Реактивы
Следует применять реактивы удостоверяемого аналитического качества, если иное не указано,
дистиллированную или деминерализованную воду, либо водуэквивалентной чистоты.
4.1 Метанол класса для ВЭЖХ.
4.2 Раствор аммиака (0.3 моль/дм3)/метанол. смесь в соотношении 90:10 пообъему.
4.3 Элюентный раствор для очистки колонки — метамол/вода/уксусная кислота, смесь в соотно
шении 75:25:1 пообъему.
4.4 Мобильная фаза — метанол/вода, смесь в соотношении 30:70 по объему.
Наливают 600 см3 метанола (4.1) в мерную колбу с одной отметкой вместимостью 2 дм3и добав
ляют водудо метки. Перемешивают и затем фильтруют смесь через фильтр с размером пор 0.45 мкм
(5.7).
П р и м е ч а н и е — При подборе нужной концентрации метанола время удерживания кофеина может быть
модифицировано так. чтобы оптимизироватьотделение его методом ВЭЖХ.
4.5 Этанол/вода. раствор всоотношении 1:4по объему.
4.6 Оксид магния* с содержанием основного вещества не менее 98 %.
4.7 Кофеин, исходный раствор массовой концентрации 0.5 г/дм3.
Взвешивают 125 мг кофеина с точностью до 0.1 мг и помещают в мерную колбу вместимостью
250 см3, выполненную изстекла.
Добавляютрастворэтанол/вода(4.5)дополовины колбы. Растворяюткофеини затем доливаютдо
метки тотже раствор этанол/вода.
Этот раствор можнохранить в холодильнике в течение месяца.
4.8 Кофеин, стандартные растворы
4.8.1 СтандартныйрастворА массовой концентрации0,010г/дм3кофеина, применяетсядля деко-
феинизированного кофе.
Доводят исходный раствор (4.7)до комнатной температуры. С помощью пипетки (5.12) помещают
2 см3этого раствора в мерную колбусоднойотметкой вместимостью 100 см3.Доливаютдо метки водой
и перемешивают.
Этот раствор готовят вдень использования.
4.8.2 Стандартный раствор Бмассовой концентрации0.05 г/дм3кофеина, применяетсядля обыч
ного кофе.
Доводят исходный раствор (4.7)до комнатной температуры. С помощью пипетки (5.12) помещают
5 см3этого раствора в мерную колбусодной отметкой вместимостью 50см3.Доливаютдо метки водойи
перемешивают.
5 Средства измерений и оборудование
Обычное лабораторноеоборудование, в частности:
5.1 Хроматограф для ВЭЖХ. снабженный ультрафиолетовым детектором, позволяющим прово
дить измерения в диапазоне от 254 до 280 нм. и самописцем. Предпочтительна длина волны ближе к
280 нм. поскольку максимальная абсорбция кофеина происходит при длине волны 272 нм.
5.2 Хроматографическая колонкадля ВЭЖХ, типаС,а,предпочтительносо сферическимичастич
ками и сэффективностью не менее 5000 теоретических пластин**.
* Мерк 5867 является рекомендуемым веществом. Эта информация дана для сведения пользователей на
стоящего стандарта и не означает, что стандарт устанавливает его применение.
** Сферисорб 5 ОДС, Сферисорб 10 ОДС. Нуклеосил 5 С18. Нуклеосип 7 С,8. Нуклеосил 10 С18- Зорбекс БП
Ci8. Хилерсил ОДС. КП-СферС,* БондепекС1а. Сулелкосил Л С18и ПартисфереС13— примеры подходящего обо
рудования. имеющегося в продаже. Эта информация дана для сведения пользователей настоящего стандарта и не
означает, что стандарт устанавливает их применение. В настоящем стандарте условия хроматографирования и со
став мобильной фазы (4.4) указаны для Картриджа колонки Партисфере Cie с размерами 110 *4,6 мм.
заполненной в Вотмен Картридж системе. При использовании других типов колонки могут потребоваться
альтернативные мо бильная фаза и условия хроматографирования.
2