ГОСТ ISO 13493—2014
Через (15 i 2) мин элюируют хлорамфеиикол с помощью 70 см5дихлорметана (см. 5.3). Выпарива
ют органическую фазу до объема примерно 1 см3 на водяной бане (см. 6.7) в слабом потоке азота
(см. 5.2) или с помощью ротационного вакуумного испарителя (см. 6.7).
С помощью примерно 10 см3дихлорметана (см. 5.3) переносят остаток в центрифужную пробирку
(см. 6.8).
Осторожно выпаривают досуха.
9.5 Жидкостная экстракция
Костаткудобавляют400 мм3 воды (V3) и 2.0 см3толуола (см. 5.4) и перемешивают с умеренной ин
тенсивностью втечение 1мин на смесителе Вортекс (см. 6.9)с частотой вращения примерно 700 мин-1.
Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (см. 6.10) с радиальным ускорением 1000 д.
Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.
Добавляют 1,5 см3 толуола и перемешиваютс умеренной интенсивностью в течение 1мин на сме
сителе Вортекс (см. 6.9) с частотой вращения примерно 700 мин ’.
Центрифугируют в течение 5 мин на центрифуге (см. 6.10) с радиальным ускорением 1000 д.
Пипеткой отбирают как можно больше органической фазы и отбрасывают ее.
Микропипеткой (см. 6.11) переносят 300 мм3водной фазы в подходящий сосуд.
9.6 Хроматографический анализ
9.6.1 Условия хроматографирования
Длина волны............................................................................. 285 нм;
диапазон шкалы детектора...................................................от 0.005 до 0.010 единиц оптической
плотности, что соответствует полной
шкале самописца;
шкала самописца.................................................................. 10 мВ;
скорость бумаги самописца...................................................1,0 см/мин;
объемная скорость потока подвижной фазы (см. 5.7). . . 0.6 см7мин;
объем анализируемого раствора, вводимый
(инжектируемый) в хроматограф.........................................100 мм3.
П р и м е ч а н и е — Инжектируемый объем и объемная скорость потока зависят от размеров колонки.
9.6.2 Хроматографирование
После стабилизации системы жидкостного хроматографа (см. 6.12) инжектируют растворы, полу
ченные из контрольной пробы и контрольной пробы с внесенным хлорамфониколом. четыре стандар
тных раствора хлорамфеникола (см. 5.9), раствор, приготовленный из анализируемой пробы по 9.5. и
снова стандартные растворы хлорамфеникола (см. 5.9).
На хроматограммах проб проверяют наличие сигнала на участке, соответствующем времени удер
живания хлорамфеникола.
9.6.3 Измерение
Измеряют высоты или площади хроматографических пиков хлорамфеникола для анализируемого
раствора и стандартных растворов хлорамфеникола.
Измеренныедля стандартных растворов высоты или площади ликовдолжны линейно зависеть от
содержания хлорамфеникола в этих растворах.
П р и м е ч а н и е — С помощью диодно-матричного детектора может быть подтверждено обнаружение хпо-
рамфеникопа при его содержании в образце более 10 мкт/кг.
10 Обработка результатов
Содержание хлорамфеникола w. мкг/кг, в анализируемой пробе рассчитывают по формуле
h s т V2
где h — высота или площадь пика в единицах длины или площади, измеренные для анализируемого
раствора;
hs — высота или площадь пика, измеренные для одного из стандартных растворов (см. 5.9);
р— содержание хлорамфеникола в стандартном растворе, мкг/см3;
4