ГОСТ ISO 16472—2014
5 Реактивы
Применяют только реактивы квалификации х.ч. для анализа, ч^.а.. если не установлено дру
гое. и только дистиллированную или деминерализованную воду, или воду эквивалентной чистоты.
5.1 Сернистокислый натрий, безводный (№2803).
5.2 Высушенная лущеная дробленая кукуруза (кукурузная мука грубого помола сырая), измель
ченная до прохода через сито с отверстиями 1 мм мельницы режущего типа.
5.3 Раствор иода, содержащий 2 г йодистого калия и 1 г иода в 100 см3воды.
Раствор хранят в бутыли из темного стекла.
5.4 Термо-стабильная альфа-амилаза, в виде раствора или водного экстракта лиофилизиро-
ванного энзимного порошка (около 1 г порошка экстрагируют в 100 см3 воды).
ПРИМЕР - Termamyl 120I от Novo Enzymes или эквивалент.
Раствор термостабильной амилазы или экстракт порошка энзима стандартизируют таким обра
зом, чтобы двукратное внесение раствора энзима по 2 см3 обеспечило удаление крахмала из 0.5 г
сырого кукурузного крахмала (5.2). Подробный метод стандартизации раствора термостабильной
альфа-амилазы приведен в приложении В.
5.5 Раствор нейтрального детергента (НД)
В мерную колбу вместимостью 1000 см1вносят 400 - 500 см3воды. Добавляют 4,0 г гидроокиси
натрия (NaOH), 14.6 г этилендиамин- NNNN-тетрауксусной кислоты (ЭДТА). 4,56 г двузамещенного
фосфорнокислого натрия (Na2HP04) и 6.81 г десятиводного борнокислого натрия (Na2B40 7 10 Н20)
и перемешивают до растворения (при необходимости нагревают). NaOH и ЭДТА могут быть замене
ны 18.6 г динатриевой соли ЭДТА.
Под вытяжкой добавляют 30 г лаурил сульфата натрия и после его растворения - 10 см3три-
этилен гликоля (противопенное средство). Доливают воду приблизительно до 950 см3и перемешива
ют. Устанавливают pH между 6.95 и 7.05 с помощью концентрированной хлористоводородной кисло ты
(HCI) или гидроокиси натрия (NaOH) и разбавляют водой до 1000 см3. Если pH выходит за уста
новленные пределы более чем на 0.5 ед. pH. раствор бракуют.
Раствор НД хранят при комнатной температуре. Если появляется осадок, раствор нагревают до
25 °С и перед использованием перемешивают. Регистрируют дату приготовления раствора НД. дан
ные измерения pH и все проведенные регулирования pH в журнале приготовления реактивов.
6 Оборудование
Используют обычное лабораторное оборудование, в том числе, следующее:
6.1 Аналитические весы, обеспечивающие взвешивание с точностью до 0.0001 г.
6.2 Мельница циклон с ситом отверстиями 2 мм или режущая мельница с ситом отверстиями
1 мм. обеспечивающие измельчение проб до получения частиц средним размером 220 - 260 мкм.
6.3 Установка для кипячения с обратным холодильником, с индивидуальными нагревателями и
водяными холодильниками, которые подходят к колбам вместимостью 600 см3.
Приемлема любая установка, применяемая при определении сырой клетчатки. Нагреватель
подбирают таким образом, чтобы обеспечить закипание 50 см3воды в течение 4 -5 мин при исполь
зовании водяных холодильников. Допускается использовать установку типа Fibertec. на которой 50
см3 воды закипает в течение 10 мин.
6.4 Тигли Гуча с дисками из фриттового стекла, крупной пористости (размер пор 40 - 60 мкм),
высокие тигли вместимостью 40-50 см3, или Р2 (размер пор 40-100 мкм) вместимостью 26 - 28 см5.
Новые тигли моют и прокаливают при температуре 500 ’С в течение 1 ч. После каждого исполь
зования тигли очищают путем прокаливания при температуре 500 в течение 3 ч, удаления золы,
погружения в раствор детергента и обработки ультразвуком в течение 7-10 мин. Споласкивают тигли
горячей водой и замачивают в воде при комнатной температуре в течение не менее 30 мин. Днище
каждого тигля снабжают резиновой пробкой, подогнанной к порту, который соединен с ловушкой и
вакуумной линией. Каждый тигель промывают путем повторного погружения тигля в воду.
Периодически контролируют скорость фильтрования следующим образом. Каждый тигель
наполняют 50 см3дистиллированной воды (25 см3для тиглей Р2 установки Fibertec) и регистрируют
время, необходимое для полного вытекания воды без вакуума (должно быть (180 160) с для тигля
Гуча или (75 1 30) с для Р2). Если время фильтрации менее 100 с (или менее 30 с для Р2). тигель
2