ГОСТ Р 52741—2007
После выполненияпроцедуры градуировки программаавтоматически рассчитываетградуировоч
ный коэффициент и среднеквадратичное отклонение имеющейся выборки. Градуировку следует счи
тать успешной, если величина СКО не превышает 5 % для никотинамида (В5), пиридоксина (В6),
пантотеновой (В3).никотиновой(В5).фолиевой(Вс)кислот и 10% в случае рибофлавина(В2).аскорбино
вой кислоты (С) и тиамина (В,), а также если отклонения времени выхода пиков компонентов не превы
шают 5 % среднеарифметических значений. Если градуировка признается неудовлетворительной,
продолжают готовить ианализироватьградуировочные растворы, создаваядополнительные градуиро
вочные уровнидо тех пор. пока указанные условия не будут выполнены. При этомдопускается отбрако
вывать неудовлетворительные данные, однако число принятых к градуировке точек должно быть не
меньше трех.
6.2.5 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале рабочего дня перед
измерениями анализируемыхпроб. Недопускается использоватьдля контроля стабильностиградуиро
вочной характеристики растворы, применявшиеся при построении градуировочных зависимостей.
Для проверки работоспособности системы и контроля стабильности градуировочной характерис
тики используютсвежеприготовленный рабочий контрольный раствор (6.2.3.6), который анализируют в
условиях, соответствующиханализу градуировочныхрастворов(таблицы 4,5). Программное обеспече
ние«МультиХром»определяетвремявыходакомпонентовивычисляетмассовую концентрацию каждо
го витамина в контрольном растворе, используя действующую на данный момент градуировочную
зависимость, построенную всоответствии с6.2.4.
Градуировка признается стабильной, если выполняется неравенство
|Х— С.\й 0.01G С„(3)
гдеX — измеренное значение массовой концентрации соответствующего витамина в контрольном
растворе, мг/дм3;
С, — массовая концентрация соответствующеговитамина в контрольном растворе, мг/дм1;
G — норматив контроля стабильности градуировочной характеристики, %.
На стадии освоения методики в качестве значения Gпринимают равным 10 % для пиридоксина и
16 %для рибофлавина.
При накоплении статистическихданных лаборатория вправе устанавливать собственные норма
тивыконтролястабильностиградуировочнойхарактеристикипри условии, чтоонинепревышаютзначе
ний. приведенныхвыше, а также использоватьдругие соединения (из числа анализируемых)в качестве
компонентов образцадля контроля.
При невыполнении условия (3) заново анализируют контрольный раствор еще два раза. При
повторных отклонениях, превышающих указанные нормативы хотя бы один раз, градуировку системы
проводят заново, начиная с приготовления новыхзапасных растворов.
Также необходимо обращать внимание на время выхода пиков компонентов, отклонения которых
недолжны превышать 5 % средних значений.
6.3 Проведение измерений
Рекомендуется начинать работу с пробами только после проведения градуировки системы или
после проверки стабильности градуировочной характеристики, что связано с необходимостью анализа
получаемых растворов в течение первых 1.5—2 ч после их приготовления.
6.3.1 Получение вытяжки витаминов из испытуемой пробы
Навеску премикса массой 1.000 гпомещаютв плоскодонную колбувместимостью 50см3,добавля
ют25 см3экстрагирующего раствора, приготовленного по 6.2.1.13, иставят в перемешивающееустрой
ство при комнатной температуре на 15 мин.
Частьполученной вытяжки переносятв центрифужную пробирку или пробиркутипа Эппендорфа и
центрифугируют в течение 5 мин при 5000—6000 об/мин. Раствор надосадком отбирают в чистую про
биркутипа Эппендорфа.
П р и м е ч а н и е — Вытяжку из навески исследуемой пробы необходимо анализировать в течение первых
1,5—2 ч после ее получения, что связано с низкой стабильностью витамина С (аскорбиновой кислоты).
6.3.2 Анализ полученных водных вытяжек
6.3.2.1 Анализ полученных вытяжеквитаминов методом КЗЭ
Методкапиллярногозонногоэлектрофореза основан намиграции иразделении ионныхформ ана
лизируемыхкомпонентовподдействием электрическогополя вследствие ихразличнойэлектрофорети
ческой подвижности.
ю