ГОСТ Р 52741—2007
вой (В3).никотиновой(В5),фолиевой (Вс) кислоти 10%вслучаерибофлавина(В2)иаскорбиновой кисло
ты (С), а также если отклонения времени выхода пиков компонентов не превышают 5 % от
среднеарифметических значений. Если градуировку признают неудовлетворительной, продолжают
готовитьианализировать градуировочный раствор, создавая дополнительные градуировочные уровни
до тех пор. пока указанные условия не будут выполнены. При этом допускается отбраковывать
неудовлетворительные данные, однако число принятых к градуировке точек должно быть не меньше
трех.
6.2.4.2 Градуировка системы методом мицеллярнойэлектрокинетической хроматографии
Рекомендуемые параметрыввода иусловияанализапредставлены втаблице5. Непосредственно
перед анализом растворы центрифугируют в течение 5 мин при5000—6000 об/мин.
Т а б л и ц а 5 — Условия анализа градуировочного раствора методом МЭКХ
Определяемые витамины а порядке выхода
Нихотииамид (В^). пиридоксим (Bj), рибофлавин (В2>.
аскорбиновая кислота <С). панготемоеая кислота (В3),
никотиновая кислота (В4), фолиевая кислота (Вс>. тиамин (В()
Ввод градуировочного раствора (пробы)
30 мбар,20 с
Условия анализа:
Длина волны, нм
200 (в начале анализа).
240 (после лика лантотеновой кислоты)
Напряжение.хВ
♦ 25
Давление, мбар
В начале анализа — 0 после появления пика лантотеновой
кислоты <Bj) прикладывают давление 50 до конца анализа
Температура. ‘ С
40
Время, мин
17—20
Ведущий электролит
№ 2 (6.2.1.10)
При выполнении анализа необходимо изменение условий регистрации электрофореграммы, а
именно приложениедавления и изменение рабочей длины волны после появления пика лантотеновой
кислоты.
Для определения момента времени, по истечении которого необходимо приложить давление и
изменить длину волны, готовят пробный раствор витаминов в соответствии с 6.2.3.5 и регистрируют
пробную электрофореграмму при длине волны 200 нм. В этом случае после регистрации лантотеновой
кислоты (пятого компонента анализируемого раствора) в ручном режиме задают давление 50 мбар и
ведутанализдо появления пика последнего компонента (тиаминхлорида)пробы. Неостанавливая ана
лиз, необходимо нажать клавишу «5» на клавиатуре прибора и внести новые условия, перелистывая
появляющиеся окна клавишей «ENT». В ручном режиме длина волны без остановки анализа не может
быть установлена, поэтому заканчивают пробную электрофореграмму при измерении на длине волны
200 нм. Пробную электрофореграммуне используютдля построенияградуировочнойзависимости. Опе
рацию нахождения времени включения давления и изменения длины волны регистрации, описанную
выше, можно выполнить один раз и использовать полученный параметрдо тех пор, пока время выхода
лантотеновой кислоты будет меньше задаваемого.
Установленный промежуток времени вносят в программу поэтапного анализа системы
«Капель-105» вместе с изменениемдлины волны регистрации (пример составления программы предс
тавлен в приложении А. таблица А.З) и используют ее для записи электрофореграмм градуировочных
растворов и анализа растворов, полученных из испытуемых проб.
Для проведенияградуировкисистемы последовательно, не менее трех раз. готовят исразужеана
лизируют градуировочныерастворы (6.2.3.5). Наполученныхэлектрофореграммахпроверяютправиль
ность автоматической разметки пиков, при необходимости, корректируют разметку, удаляют лишние
пики и далее обрабатывают электрофореграммы согласно процедуре градуировки, описанной в руко
водстве пользователя программы «МультиХром». В таблице компонентов должно быть столько строк,
сколько витаминов анализируют. В таблице концентраций создают столько градуировочных уровней,
сколько получено электрофореграмм, при этом концентрации компонентов в каждом уровне будут
одинаковые.
9