rOCTEN 14132-2013
творите ля через колонку увеличивают, создавая некоторое избыточное дав
ление с помощью азота Колонку кондиционируют, пропуская через нее сна
чала 15 см3 метанола, затем 5 см3 раствора двууглекислого натрия по 4.8,
элюат отбрасывают
Аликвоту прозрачного центрифугированного экстракта по 6.2.1 объе
мом 10 см3 помещают в стакан, куда добавляют 10 см3раствора двууглекис
лого натрия по 4.8. Разбавленный таким образом экстракт пропускают через
фенил силильную колонку, при этом скорость протока не должна превышать
5 см3/мин. Далее через колонку пропускают сначала 10 см3 промывного рас
твора 1 по 4.18, затем 5 см3 промывного раствора 2 по 4.19, при этом ско
рость протока также не должна превышать 5 см3/мин. После этого колонку
отсоединяют от манифолда и высушивают путем пропускания через нее с
помощью шприца не менее 10 см3воздуха Затем колонку устанавливают над
стеклянным флаконом подходящей вместимости и элюируют охратоксин А с
помощью 10 см3 элюента по 4.20 при скорости протока, не превышающей
5 см3/мин.
6.2.3 Очистка экстракта на колонке с иммуноаффинным сорбентом
Полученный по 6.2.2 элюат разбавляют 30 см3 фосфатно-хлоридного
буферного раствора по 4.7. Иммуноаффинную колонку по 4.25 устанавлива
ют в вакуумный манифолд, к входному концу колонки присоединяют резер
вуар по 5.6. В резервуар вносят элюат, разбавленный фосфатно-хлоридным
буферным раствором, и пропускают его через колонку со скоростью не более
5 см3/мин. При этом не допускается попадание в колонку воздуха Колонку
промывают 10 см3 воды, после чего ее отсоединяют от манифолда и поме
щают над стеклянным флаконом по 5.2, предназначенным для сбора элюата
6.2.4 Приготовление раствора пробы для хроматографического
анализа
Охратоксин А элюируют четырьмя порциями элюента, указанного в
инструкции по применению колонки, объемом 1 см3каждая, элюат собирают
во флакон по 5.2. По окончании элюирования растворитель удаляют в токе
10