ГОСТ 32277— 2013
Допускается использование другого оборудования с техническими характеристиками, а также ма
териалов и реактивов по качеству не ниже вышеуказанных.
5.5.1.3 Проведение анализа
Сперму тщательно перемешивают и набирают до метки «1» в меланжер, предварительно обра
ботанный смесью спирта и эфира в соотношении 1 : 1 и высушенный. Для разбавления спермы и обе
здвиживания сперматозоидов в меланжер вводят до метки «101» 3 %-ный раствор хлористого натрия
(разбавление спермы в 100 раз). Зажав большим и указательным пальцами оба конца наполненного
меланжера, тщательно перемешивают содержимое, переворачивая меланжер вверх и вниз не менее 60
раз.
Удалив из меланжера первые три - четыре капли, кончик меланжера обтирают марлевой сал
феткой и осторожно наносят одну каплю смеси на край притертого к счетной камере шлифовального
покровногостекла. Капля, затекая под стекло, заполняет камеру Горяева. Подсчет сперматозоидов про
водят при таком увеличении микроскопа, чтобы в поле зрения помещалось 16 малых (один большой)
квадратов. Сперматозоиды подсчитывают в 80 малых (пяти больших) квадратах, расположенных по
диагонали. Для подсчета сперматозоидов, расположенных в глубине камеры, постоянно вращают ми
кровинт. Положение сперматозоидов внутри или вне квадрата определяют по месту нахождения голов ки.
Головки, расположенные на левой и верхней линиях, относят к тому квадрату, в котором проводят
подсчет. Головки можно также учитывать на правой и нижней линиях.
5.5.1.4 Обработка результатов
Концентрацию сперматозоидов спермы С. млрд/см3, вычисляют по формуле
200
‘
(3)
где п - количество подсчитанных сперматозоидов в 80 маленьких квадратах;
200 - постоянный коэффициент.
Пример
В 80 маленьких (пяти больших) квадратах насчитали 100 сперматозоидов
.
Следовательно, кон-
центрация сперматозоидов в см3 составит
С»
2U0
•О,S шярО/см1
5.5.2 Определение концентрации сперматозоидов путом изморония светорассеяния
5.5.2.1 Сущность метода заключается в определении оптической плотности спермы, величина
которой пропорциональна концентрации сперматозоидов.
5.5.2.2 Средства измерений, материалы, посуда и реактивы
Для проведения анализа применяют:
- фотометр, спектрофотометр, фотоэлектроколориметр, позволяющие измерять оптическую
плотность раствора в диапазоне длин волн от (675 ± 25) нм при допускаемой абсолютной погрешности
измерения спектрального коэффициента пропускания не более ± 2 % в оптических кюветах толщиной
поглощающего слоя
10
мм;
- воронка лабораторная В-56-80 ХС по ГОСТ 25336:
- пробирки типа П2Т по ГОСТ 25336 вместимостью 10 см3;
- пипетку градуированную вместимостью 10 см3 по ГОСТ 29227;
- микропипетку вместимостью 0.1 см3;
- салфетки марлевые по ГОСТ 9412;
- бумагу фильтровальную по ГОСТ 12026:
- натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 22280. 3 %-ный раствор.
Допускается использование других средств измерений с метрологическими характеристиками, а
также материалов, реактивов и посуды по качеству не ниже вышеуказанных.
5.5.2.3 Подготовка к проведению анализа
Построение градуировочного графика
Для построения градуировочного графика используют сперму с высокой концентрацией сперма
тозоидов. из которой готовят разведения различной концентрации. Например, берут сперму с концен
трацией сперматозоидов, равной 1,2 млрд/см3. Сперму разводят 3,5 %-ным раствором лимоннокислого
5