ГОСТ 32277— 2013
В каждом препарате подсчитывают по 100 - 150 сперматозоидов. Отдепьно считают количество
сперматозоидов с окрашенными и неокрашенными головками. Сперматозоиды с головками, окрашен
ными частично, относят к мертвым.
8.2.5 Обработка результатов
Количество мертвых сперматозоидов Нс. %, вычисляют по формуле
С*
Нс
с
+С-
100
,
(
6
)
где С* - количество сперматозоидов с окрашенными головками, шт.;
С - количество сперматозоидов с неокрашенными головками, шт.
За окончательный результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов
двух измерений, выполненных в условиях повторяемости по ГОСТ ИСО 5725-1. Допускаемые расхож
дения между результатами определений не должны превышать 10 %.
8.3Определение размеров сперматозоидов
8.3.1 Сущность метода
Сущность метода заключается в измерении сперматозоидов под микроскопом в проходящем све
те при помощи окулярного микроскопа.
8.3.2 Оборудование, материалы и реактивы
Для проведения анализа применяют:
- микроскоп биологический различных марок с окуляром 15* и объективом 20* или 40*;
- микрометр окулярный винтовой типа МОЕМ-15х;
- объект-микрометр типа ОМО с ценой деления шкалы 0.01 мм по ГОСТ 6507;
- стекла предметные 26 * 100 по ГОСТ 9284;
- стекла покровные 18 * 18 по ГОСТ 6672;
- натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 22280. 3 %-ный раствор;
- эозин водорастворимый или нигрозин по ГОСТ 9307.
Допускается использование другого оборудования с техническими характеристиками, средств из
менений с метрологическими характеристиками, а также материалов, реактивов и посуды по качеству не
ниже вышеуказанных.
8.3.3 Подготовка к проведению анализа
8.3.3.1Масштаб линейки и окулярного винтового микрометра меняют в зависимости от применя
емого окуляра, объектива и величины тубуса микрометра. Истинную величину деления линейки опре деляют
объект-микромет-ром. Для этого на предметный столик микроскопа помещают объект-микро
метр. фиксируют объектив на шкале объект-микрометра и. наблюдая в микроскоп, совмещают линейки
окуляр- и объект-микрометра. Определяют, сколько делений объект-микрометра приходится на опреде
ленное число делений окуляр-микрометра.
Истинное значение деления микрометра окулярного винтового N. мкм. вычисляют по формуле
где л, - число делений объект-микрометра, умноженное на величину одного деления, мкм;
п2 - число делений микрометра окулярного винтового, совпадающих с числом делений объект-
микрометра.
Пример
Пять делений объект-микрометра покрывают 20 делений окуляр-микрометра. Одно деление объ
ект-микрометра равно 10 мкм. В этом случае одно деление линейки окуляр-микрометра будет равно
5.Ю
N =
-------
-- 2,5мкм
20
8.3.3.2 Готовят раствор 3%-го лимоннокислого натрия no 8.2.3.3.
8.3.3.3 Затем на 3 %-ном растворе лимоннокислого натрия готовят красящую или фоновую краску:
2 %-ный раствор эозина водорастворимого или 5 % - 10 %-ный раствор нигрозина.
12