ГОСТ 32277— 2013
Сперматозоиды имеют выживаемость не менее 5 ч. если после 5 ч инкубации спермы в термо
стате при температуре (37 ± 1) °С в ней обнаруживают не менее 1 % сперматозоидов с прямолинейным
поступательным движением (ППД).
7 Методы биохимического анализа
7.1 Определение содержания кетоновых тел
7.1.1 Сущность метода
Сущность качественного метода анализа содержания кетоновых тел в неразбавленной свежепо-
лученной сперме заключается в положительной реакции нитропруссидной пробы в присутствии кетоно
вых тел и визуальной оценке интенсивности окрашивания.
7.1.2 Оборудование и реактивы
Для проведения анализа применяют:
- пробирки стеклянные типа П 2Т вместимостью 10 см3по ГОСТ 25336;
- пипетки пастеровские;
- натрий нитропруссид. насыщенный раствор;
- сульфосалициловую кислоту по ГОСТ 4478,10 %-ный водный раствор.
- натрия гидрооксид (натрий едкий) по ГОСТ 4328, 40 %-ный раствор;
- воду дистиллированную по ГОСТ 6709.
Допускается использование других реактивов и посуды по качеству не ниже вышеуказанных.
7.1.3 Подготовка к проведению анализа
7.1.3.1 Приготовление 10 %-ного раствора сульфосалициловой кислоты
В стеклянную пробирку вместимостью 10 см3по ГОСТ 25336 вносят 1.00 г порошка сульфосали
циловой кислоты и растворяют в 9.0 см3дистиллированной воды.
Раствор применяют свежеприготовленным.
7.1.3.2 Приготовление 40 %-ного раствора гидроокисида натрия
В стеклянной пробирке вместимостью 10
cmj
по ГОСТ 25336 растворяют 4,00 г гидрооксида на
трия в 6.0 см3 дистиллированной воды.
Раствор применяют свежеприготовленным.
7.1.4 Проведение анализа
В пробирку вместимостью 10 см3вносят 0,4 см3неразбавленной свежеполученной спермы, при
бавляют три капли 10 %-ного раствора сульфосалициловой кислоты. Пробирку встряхивают, затем до
бавляют одну каплю насыщенного раствора нитропруссида натрия. Пробирку снова тщательно встря
хивают после чего осторожно пастеровской пипеткой с длинным концом подслаивают на дно пробирки
0,2 - 0,3 см340 %-ного раствора гидрооксида натрия.
При наличии кетоновых тел на границе соприкосновения раствора гидрооксида натрия со спер
мой в течение 30 с образуется окрашенное кольцо.
7.1.5 Обработка результатов
Массовую долю кетоновых тел в процентах определяют по интенсивности окрашивания кольца:
- слабо-розовое и светло-малиновое окрашивание - 0,5 - 2,9 103 %;
- окрашивание в малиновый цвет - 3,0 - 3,4 •10‘3 %;
- окрашивание в вишневый цвет - 3.5 - 4,9 • 10 3%;
- окрашивание в темно-вишневый цвет - более 5 • 103% кетоновых тел.
8Методы морфологического анализа
8.1 Определение содержания сперматозоидов с аномальной морфологией и включений
8.1.1 Сущность метода
Сущность метода заключается в подсчете под микроскопом патологических форм сперматозои
дов и включений спермы. При подсчете патологических форм сперматозоидов учитывают количество
сперматозоидов с аномальной морфологией.
П р и м е ч а н и е - К аномальным формам относят сперматозоиды с отклонениями в строении головки
(микроскопическая, круглая, несимметричная, укороченная, заостренная, двойная, без мембраны или жгутика),
шейки (двойная, ломаная, изогнутая, укороченная), тела (изогнутое, удвоенное, нитевидное, с цитоплазматической
8