ГОСТ 32277— 2013
8.1.4.2Для лучшей видимости сперматозоидов проводят окрашивание мазка или затеняют его
фон. Для создания темного фона вносят черную тушь или краску - 10 %-ный водный раствор нигро
зина. При этом сперматозоиды не окрашиваются, но их контуры на затемненном фоне ясно очерчены.
Для окрашивания сперматозоидов применяют водный 10 %-ный раствор эозина или нейтральные
красители (по методу Романовского).
Окрашивание эозином
Окрашивание сперматозоидов эозином проводят, добавляя к сперме в пробирке или на предмет
ном стекле двойное или тройное количество краски. Смесь выдерживают в течение 3 -5 мин. делают
мазок и микроскопируют.
Окрашивание азур-эозином по Романовскому
Используют готовую краску Гимза. представляющую собой смесь в определенных пропорциях
метилен-азура, метиленового фиолетового и метиленового синего.
Перед окрашиванием приготавливают раствор краски. Для этого к 10 см3дистиллированной воды
добавляют 0.5 - 1.0 см3 краски. Окрашивание проводят в стеклянных цилиндрах, помещая в них пред
метные стекла с мазком спермы на 20 - 30 мин. Затем мазок промывают в течение 30 - 60 мин дистилли
рованной водой, высушивают и микроскопируют. Для длительного хранения мазков (более 6 -1 2 мес)
предметное стекло после высушивания проводят через этиловый спирт и ксилол.
Подсчет нормальных и патологических форм сперматозоидов проводят в проходящем свете ми
кроскопа с иммерсионной системой (увеличение 600 - 1350 раз). При подсчете используют клавишный
прибор для подсчета форменных элементов крови. При отсутствии счетчика ведут запись на бумаге.
Подсчитывают примерно общее количество 100 - 150 сперматозоидов, учитывая отдельно количество
нормальных и патологических форм.
Также при подсчете общего количества сперматозоидов учитывают число включений спермы
(форменные элементы крови, эпителиальные клетки и т.д.).
8.1.5 Обработка результатов
Подсчет сперматозоидов и включений проводят не менее чем в трех мазках, суммируя отдельно
количество патологических форм, нормальных сперматозоидов и включений спермы.
Содержание патологических форм сперматозоидов А/П. %. вычисляют по формуле
п
где П - количество патологических форм сперматозоидов, шт.;
Н - количество нормальных форм сперматозоидов, шт.
Содержание включений спермы NB,%, вычисляют по формуле
-V.
_
п +н
ю о .
(4)
п +н
N
в
— ^— 100.
(5)
где В - количество включений спермы, шт.
Пример
В трех мазках спермы всего насчитано 110 сперматозоидов, в том числе 25 патологических и 85
нормальных форм. Кроме того, насчитано семь включениО.
Следовательно, содержание патологических форм вычисляют по формуле
содержание включениО:
N
= ——— 100 - 22,7 %
р25■+85
N
р
-----
------
100
25 + 85
6,3% .
8.2 Определение количества мертвых сперматозоидов
10