ГОСТ 32223—2013
концентрации 0.1 %. В пробирку «контроль» вносят 0.5 см3этилового спирта (см. 4.2.12). В пробирках
с пробой формируется белый хлопьевидный осадок.
В обе пробирки («проба» и «контроль») с помощью бутылочного дозатора добавляют по б см3
концентрированной H2S04при постоянном помешивании стеклянной палочкой длинной 200 мм.
П р и м е ч а н и е — 6 см1серной кислоты необходимо равномерно влить за 7 с. Это условие обязатель
но. так как именно за этот промежуток времени раствор в пробирке достигает температуры 85 “с. необходимой
для получения стабильной окраски раствора, и избегается интенсивное закипание раствора в пробирке.
Пробирки немедленно помещают в водяную баню с температурой 85 “С на 5 мин при постоян
ном помешивании.
Охлаждают в водяной бане температурой 20 °С в течение 15 мин.
В течение не более 20 мин измеряют оптическую плотность раствора пробы в пластиковых од
норазовых кюветах на спектрофотометре при длине волны 525 нм по отношению к «контролю».
7.2 Для исключения возможных ошибок, связанных с реакцией раствора карбазола. проводят
контрольное определение только с данным раствором (с дистиллированной водой вместо пробы).
Для этого готовят четыре раствора, оптическую плотность которых измеряют друг против друга:
а) 1 см3экстракта ♦ 0.5 см3спиртового раствора карбазола + 6 см3H2S04;
б) 1 см3экстракта ♦ 0,5 см3этилового спирта ♦ 6 см3 H2S04;
в) 1 см3дистиллированной воды + 0.5 см3спиртового раствора карбазола ♦ 6 см3H2S04;
г) 1 см3дистиллированной воды + 0.5 см3этилового спирта + 6 см3H2S04.
Оптическую плотность раствора «а» измеряют против раствора «б» (значение «х»). Оптическую
плотность раствора «в» измеряют против раствора «г» (значение «у»). Значение массовой концен
трации (массовой доли) пектина (выраженное в массовом содержании ангидрида галактуроновой ки
слоты) («х — у») определяют по градуировочной зависимости по разделу 8.
Рекомендуется включать проверку стабильности градуировочной зависимости рабочим градуи
ровочным раствором (например. 40 мг/дм3галактуроновой кислоты) в каждую серию определений.
7.3 Условия проведения измерений
Измерения проводят в следующих лабораторных условиях:
- температура окружающего воздуха...............................(25 ± 5) °С;
- атмосферное давление...................................................... (97 ± 10) кПа:
- относительная влажность................................................. (65 ± 15) %.
8 Построение градуировочной зависимости
8.1 Приготовление основного градуировочного раствора
120.5мг моногидрата галактуроновой кислоты, количественно переносят в мерную колбу вме
стимостью 1 дм3. В колбу добавляют 0,5 см3 раствора гидроокиси натрия молярной концентрации 1
моль/дм3, затем доводят объем до метки дистиллированной водой. После перемешивания содержи
мого колбу оставляют на ночь при комнатной температуре. Полученный основной градуировочный
раствор содержит 100 мг ангидрида галактуроновой кислоты (ГКА) в 1 дм3.
Срок хранения раствора — не более 3 мес в темном месте при комнатной температуре.
8.2 Приготовление рабочих градуировочных растворов
Готовят серию градуировочных растворов, массовая концентрация ангидрида галактуроновой
кислоты в которых составляет 10. 30. 40. 50 и 70 мг/дм3. Растворы готовят в мерных колбах вмести
мостью 100 см3 в которые вносят соответственно 10. 30. 40, 50 и 70 см3 основного градуировочного
раствора. Доводят объем раствора до метки дистиллированной водой.
Растворы используются свежеприготовленными.
8.3 Построение градуировочной характеристики
Выполняют операции в соответствии с разделом 7. вводя вместо пробы по 1 см3 градуировоч
ных растворов, приготовленных по 8.1 и 8.2. Измеряют оптическую плотность растворов. В каждой
точке проводят не менее трех измерений. За результат измерения оптической плотности
каждого градуировочного раствора принимают среднеарифметическое значение трех измерений.
5