ГОСТ 32198—2013
Пример
Высеяно 0,5 см3 спермы, разбавленной в соотношении 1 : 10. Подсчет полоний проведен на У*пло
щади чашки, насчитано 20 колоний. Следовательно, количество микроорганизмов вычисляют следую
щим образом
20-10
0.5 0.25
= 1666.
Таким образом, в 1 см3 спермы содержится 1666 микроорганизмов (КОЕ).
Количество микроорганизмов в 1 см2’ неразбавленной спермы С при большом количестве вы
росших колоний вычисляют по формуле
N V
(
2
)
где
Л
/— количество колоний, насчитанных в 10 квадратах;
л/?2 — площадь чашки, см2;
D — разведение спермы;
п — число квадратов, взятых для подсчета посева, см3;
V— объем суспензии спермы, взятой для посева, см3.
Пример
При высеве 0,5 см3 спермы, разведенной в соотношении 1 : 10, в каждом из квадратов насчитано
колоний: 8. 10, 12, 11, 7, 14, 8, 12, 18 и 14. Всего 114. Следовательно, количество микроорганизмов вы
числяют следующим образом
114-3.14 52-10
С
0.5-10
_
=---------------------
= 17898.
Таким образом, в 1 см3 спермы содержится 17898 микроорганизмов (КОЕ).
8.2 Определение бактерий группы кишечной палочки
8.2.1 Количество бактерий группы кишечной палочки, обнаруженной в сперме, выражают в виде
коли-титра (титр кишечной палочки) или коли-индекса.
Коли-титр можно перевести в коли-индекс и наоборот. Для перевода коли-титра в коли-индекс
единицу делят на объем, выражающий коли-титр. Например, установлен коли-титр. равный 0.01 см3
(разведение 1 :100). Следовательно, коли-индекс будет равен; 1 : 0,01 = 100, т. е. в 1 см3 содержится
100 кишечных палочек.
Для перевода коли-индекса в коли-титр необходимо единицу разделить на число, выражающее
коли-индекс. Например, коли-индекс равен 100. В этом случае коли-титр равен: 1 :100 = 0.01.
8.2.2 Проведение исследования
Коли-титр определяют методом бродильных проб при посеве на среду Булира. Сущность мето
да заключается в сбраживании микробами маннита, которое сопровождается выделением газа и из
менением цвета среды.
В три пробирки, содержащие 5-7 см3среды Булира. высевают по 1 см3 из одного разведения
или из различных разведений спермы (1:10. 1:100, 1:1000). Сперму разводят физиологическим рас
твором.
Пробирки с посевом выдерживают в термостате при температуре (37.5
±
0.5) еС в течение
18-24 ч. В результате осмотра пробирок устанавливают бродильный титр.
8.2.3 Обработка результатов
При отсутствии помутнения среды и газообразования реакцию считают отрицательной. Измене
ние цвета среды (пожелтение, помутнение) и газообразование (пузырек в газовке) указывают на раз
множение в среде бактерий группы кишечной палочки, в этом случае реакцию считают положитель
ной.
10