ГОСТ 32198—2013
Среду готовят в день применения. Допускается применение сухой готовой среды Эндо.
7.2.4 Приготовление среды Булира
К 1дм3МПБ по 7.2.1 с pH 7.0-7.4 добавляют 2.5 г маннита и насыщенный раствор иейтральрота
до окрашивания в вишнево-красный цвет. Затем разливают по 7 см3в пробирки с поплавками и сте
рилизуют в автоклаве при температуре 115 °С — 120 °С и давлении 0.7 атм в течение 30 мин. Виш
нево-красный цвет в пробирках должен остаться без изменений.
Срок хранения среды в защищенном от света месте при температуре 5 °С — 8°С — не более 20
дней.
7.2.5 Приготовление среды Китт Тароцци
Для приготовления среды Китт-Тароцци берут 37 % мясной воды. 25 % печеночной воды. 0.5 г
NaCI. пептон по ГОСТ 13805 и разбавляют дистиллированной водой до 100 см3. Полученный сте
рильный раствор разливают по 100 см3в стерильные пробирки, на дне которых находятся два — три
кусочка печени размером 0.5-1,0 см. сверху наслаивают стерильное вазелиновое масло слоем тол
щиной 1,0-1,5 см.
Срок хранения среды в защищенном от света месте при температуре 2 °С — 25°С — не более
двух лет.
7.2.6 Питательная среда для выращивания St. aureus
Берут 10.0 г сухого ферментативного пептона. 5.0 г хлористого натрия. 2.5 г двузамещенного
фосфата калия. 2.5 г глюкозы и растворяют в 1000 см3дистиллированной воды.
Срок хранения среды в сухом защищенном от света месте при температуре 10 °С — 25 °С — не
более четырех лет.
7.2.7 Питательная среда для идентификации St. aureus
Берут 10.0 г сухого ферментативного пептона. 75.0 г хлористого натрия. 10,0 г маннита. 0.025 г
фенолового красного. 15.0 г микробиологического агара и растворяют в 1000 см1дистиллированной
воды.
Срок хранения среды при температуре 2 вС — 4 вС — не более трех недель.
7.2.8 Приготовление изотонического (физиологического) раствора хлористого натрия
В 1 дм3 дистиллированной воды растворяют 9,0 г хлористого натрия. Раствор разливают в про
бирки по 5 или 10 см3, учитывая, что после стерилизации объем в пробирках должен составлять со
ответственно 4.5 или 9.0 см3. Стерилизуют раствор при температуре 120 °С и давлении 1,0-1.5 атм в
течение 30 мин. Стерильный физиологический раствор разливают в стерильные флаконы.
Срок хранения раствора в стеклянных флаконах, укупоренных ватно-марлевыми пробками, —
не более 14 дней, резиновыми пробками, завальцованными алюминиевыми колпачками при темпера
туре 20 °С — 25 °С, — не более шести месяцев.
7.2.9 Приготовление реактивов для окраски по Граму
7.2.9.1 Кристаллвиолет-карболоеый раствор (реактив 1)
1 г кристаллгенцианвиолета или кристаллметилвиолета растирают в фарфоровой ступке с 2 г
карболовой кристаллической кислоты и несколькими (тремя — пятью) каплями глицерина. Во время
растирания небольшими порциями прибавляют 10 см3 96 %-ного спирта ректификата. После тща
тельного растирания приливают при постоянном помешивании 100 см3дистиллированной воды. Рас
твор оставляют на сутки и фильтруют через бумажный фильтр.
Срок хранения кристаллвиолет-карболового раствора в темном прохладном месте при темпера
туре 2 °С — 5 °С — не более двух месяцев.
7.2.3.2 Раствор
Л
юголя (реактив 2)
2 г йодистого калия растворяют в 5-10 см3 дистиллированной воды, прибавляют 1 г кристалли
ческого йода, раствор оставляют на несколько часов до полного растворения йода и после этого до
ливают дистиллированной водой до 300 см3.
Срок хранения раствора в сухом защищенном от света месте при температуре 8 °С — 15 °С —
не более 30 дней.
7.2.9.3 Спирто-водный раствор фуксина (реактив 3)
Для приготовления реактива 3 растворяют 1 см3 насыщенного раствора фуксина (основного
фуксина — 8-9 г. спирта этилового — 100 см3) в 10 см3дистиллированной воды.
Срок хранения в сухом защищенном от света месте при температуре 10 °С — 35 еС — не более
одного года.
7.2.10 Приготовление реактивов для окраски по Граму в модификации Калины
7.2.10.1 Раствор кристаллвиолета 0.5 %-ный спиртовый (реактив 4)
8