ГОСТ 32198—2013
6 Отбор и подготовка проб
6.1 Общие требования
Для проведения исследований используют свежеполучениую неразбавленную и разбавленную
сперму, хранившуюся не более 6 ч при температуре 2 °С — 5 °С, и замороженную сперму, хранившу юся
не более 30 мин после оттаивания.
6.2 Отбор проб
Отбор проб проводят по ГОСТ 32222.
6.3 Подготовка проб
Разведения спермы для посевов готовят следующим образом: к 4.5 или 9.0 см3 стерильного
0.9 %-ного раствора хлористого натрия добавляют соответственно 0,5 или 1.0 см3 спермы свежепо-
лученной неразбавленной, свежеполученной разбавленной или замороженной после оттаивания.
Тщательно перемешивают и готовятдесятикратные разведения от 1:10 до 1:1000.
При разведении спермы можно пользоваться одной стерильной пипеткой. Раствор набирают ре
зиновой грушей или полиэтиленовым баллончиком и тщательно (не менее трех раз) промывают пи
петку раствором из той пробирки, в которую перенесли суспензию. Если эти требования не могут
быть выполнены, то для каждого разведения берут новую стерильную пипетку.
Следует учитывать, что приготовление разведений с использованием одной пипетки может при
вести в отдельных случаях к завышению показателей вследствие адсорбции микроорганизмов на
стенках пипетки. В результате адсорбированные микроорганизмы могут попадать в пробирку с более
высоким разведением.
7 Подготовка к исследованиям
7.1 Подготовка лабораторной посуды и материалов
7.1.1 Приготовление хромовой смеси для мытья посуды
Хромовую смесь готовят одним из следующих способов.
Способ 1. К 3000 см3концентрированной серной кислоты добавляют 50 г измельченного двух
ромовокислого калия. Смесь взбалтывают и оставляют до растворения двухромовокислого калия.
Через сутки раствор темно-оранжевого цвета может быть применен для мытья посуды. Изменение
темно-оранжевого цвета смеси на темно-зеленый указывает на ее непригодность.
Способ 2. В 1000 см3 дистиллированной воды растворяют 10 г неочищенного измельченного дву
хромовокислого калия и. перемешивая жидкость, небольшими порциями вливают 1000 см3концентри
рованной серной кислоты.
7.1.2 Новую лабораторную посуду кипятят в течение 15 мин в дистиллированной воде, подкис
ленной соляной кислотой, или выдерживают в течение трех — четырех часов в 10 %-ном растворе
соляной кислоты, а затем промывают водопроводной водой и моют с помощью ерша в растворе, со
держащем в 1000 см3 дистиллированной воды 30 г стирального порошка и 50 см3 нашатырного спирта,
или в растворе, содержащем в 1000 см3дистиллированной воды 80 г хозяйственного мыла, нарезан ного
на мелкие кусочки, и 40 г кальцинированной соды.
Раствор с хозяйственным мылом кипятят до полного растворения мыла.
Л
абораторную посуду
тщательно промывают водопроводной, а затем дистиллированной водой, высушивают и стерилизу ют.
7.1.3
Л
абораторную посуду, бывшую в употреблении и сильно загрязненную, моют 2 % — 3 %-
ным раствором двууглекислой соды или 1.0 % — 1.5 %-ным раствором кальцинированной соды,
оставляют на 24 ч в хромовой смеси по 7.1.1, тщательно промывают водопроводной, а затем дистил
лированной водой и подвергают стерилизации.
7.1.4 Предметные и покровные стекла обезжиривают погружением их не менее 24 ч в смесь, со
стоящую из равных частей этилового спирта и диэтилового эфира.
Чистоту стекла вымытой и высушенной посуды контролируют нанесением на его поверхность
капли воды. При достаточном обезжиривании капля расплывается равномерно.
6