ГОСТ 32011—2013
5.1.1.2 Приготовление готовой среды
Непосредственно перед применением в среду (см. 5.1.1)добавляют 1см3или4 см3раствора ново-
биоцина (см. 5.1.1.1) или к 225 см3, или к 900 см3охлажденной среды mTSB (см. 5.1.1).
Конечная концентрация новобиоцина равна 20 мг/дм3среды mTSB.
5.2Первая селективная срода для выделения микроорганизмов: агаровая среда
Мак-Конки с сорбитом и суплементом СТ (цефиксим и теллурит калия) (CT-SMAC)
5.2.1 Основная среда
Состав:
Ферментативный перевар казеина................................17,0 г
Ферментативный перевар животных тканей
.
............... 3.0 г
Сорбит..................................................................................10.0 г
Желчные соли No. 3 ......................................................... 1.5 г
Хлорид натрия................
...
...............................................5.0 г
Нейтральный красный......................................................0.03 г
Кристаллический фиолетовый.......................................0.001 г
Агар.............................................„ .....................................9—18 г*
Дистиллированная вода................................................... 1 000 см3
5.2.1.1 Приготовление среды
Растворяют основные компоненты или готовую дегидратированную основу в воде, при необходи
мости кипятят. Устанавливают уровень pH (см. 6.6). если необходимо, чтобы после стерилизации он со
ответствовал (7.1 i 0.2) при температуре 25 °С. стерилизуют в течение 15 мин в автоклаве (см. 6.1) при
температуре 121 вС.
5.2.2 Раствор теллурита калия
Состав:
Теллурит калия для бактериологического исследования0,25 г
Дистиллированная вода 100 см3:
5.2.2.1 Приготовление
Растворяют теллурит калия в воде и стерилизуют фильтрованием через микропористую мембрану.
Раствор можно хранить при комнатной температуре в течение 1 мес. но. если образуется белый
осадок, его не применяют.
5.2.3 Раствор цефиксима
Состав:
Цефиксим............................................................................5.0 мг
Дистиллированная вода...................................................100.0 см3
5.2.3.1 Приготовление раствора
Растворяют цефиксим в воде и стерилизуют фильтрованием через микропористую мембрану.
П р и м е ч а н и е — Возможно, цефиксим надо будет растворить в этаноле.
Этот раствор хранят при температуре (3 i 2) °С в течение 1 иед.
5.2.4 Готовая питательная среда
Состав среды:
Основная среда (см. 5.2.1)................................................ 1 000 см3
Раствор теллурита калия (см. 5.2.2).............................1.0 см3
Раствор цефиксима (см. 5.2.3)......................................1.0 см3
5.2.4.1 Приготовление среды
Основную среду сразу же после стерилизации или охлаждают (см. 5.2.1) до температуры от 44 °С
до 47 °С (см. 6.5). или расплавляют ее. пропаривая предварительно стерилизованную и застывшую
основную среду, а затем охлаждают до температуры от 44 °С до 47 °С.
Добавляют 1 см3растворателлурита и 1см1раствора цефиксима к 1000 см3основной среды. Переме
шивают и разливаютприблизительно по 15см3в стерильные чашки Петри(см. 6.15). Оставляют застывать.
Окончательная концентрация теллурита составляет 2.5 мг/дм3, а цефиксима — 0.05 мг/дм3.
Непосредственно перед употреблением чашки с агаром высушивают, сняв крышки и перевернув их
вверх дном, в сушильном шкафу при температуре от 25 еС до 50 СС (см. 6.2). пока с поверхности среды не
исчезнут все капли. Чашки с агаром можно также сушить в защитном шкафу с ламинарным потоком в
течение 30 мин с приоткрытыми крышками или оставить на ночь с закрытыми крышками.
* В зависимости от прочности геля.
3