ГОСТ 32011—2013
Добавляют 1 см3 реактива Ковача (см. 5.6) и оставляют при комнатной температуре в течение
10 мин.
Появление красного цвета указывает на положительную реакцию. Желто-коричневый цвет указы
вает на отрицательную реакцию.
9.5.3 Серологическая идентификация
9.5.3.1 Общее требование
Исследуют только индол-положительные колонии на серологическую реакцию с антисывороткой к
E.coli 0157.
9.5.3.2 Выделение автоагглютинирующих штаммов
Одну каплю солевого раствора (см. 5.9) капают на чистое предметное стекло.
Используя петлю (см. 6.10), подмешивают к этой капле одну колонию из чашки с питательным ага
ром (см. 9.5.1). чтобы получилась однородная и мутная суспензия.
Осторожно встряхивают стекло в течение 30—60 с. Наблюдают за результатом на темном фоне и.
в случае необходимости, с помощью увеличительных линз.
При обнаружении в суспензии видимых скоплений бактерий считается, что штамм способен авто-
агглютинировать и далее недолжен тестироваться, так как реакция со специфической антисывороткой
невозможна.
9.5.3.3 Реакция сантисывороткой против Е. coli 0157
Используя чистую культуру из питательного агара (см. 9.5.1). суспендируют ее в свежей капле со
левого раствора, как описано в 9.5.3.2 и добавляют маленькую каплю антисыворотки против Е. coli 0157
(см. 5.10).
Реакция является положительной, если агглютинация проявляется в течение 1 мин.
9.5.3.4 Положительная идентификация
Считать положительными штаммы, которые дают положительную реакцию на индол и реагируют
либо с антисывороткой против 0157. либо с антисыворотками против 0157 плюс Н7.
10 Обеспечение качества испытания
10.1 Испытуемые штаммы
Для обеспечения качества испытаний штаммы Е. coli 0157, которые не имеют коэффициентов ви
рулентности. характернойдля патогенности, можно получить из национальных или международныхкол
лекций культур. Их рекомендуется применять для испытания сред и антисывороток.
10.2 Культуральный метод
Для проверки возможности лаборатории и среды обнаруживать низкое содержание бактерий
Escherichia coli 0157 в пищевых пробах, подлежащих анализу с помощью метода, описанного в настоя
щем стандарте, контрольные пробы инокулята низкой концентрации непатогенных Е. coli 0157 и высо
кой концентрации другого штамма Е. coli должны исследоваться параллельно с пробой для анализа.
11 Выражение результатов
Для интерпретации результатов следует представить данные о присутствии или отсутствии бакте
рии Escherichia coli 0157 в пробе для анализа, указав массу в г или объем в см3 пробы.
12 Протокол испытания
В протоколе испытания указывают:
- всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы:
- используемый метод отбора проб (если известен):
- используемый метод испытания со ссылкой на настоящий стандарт;
- температуру инкубации;
- все детали исследования, не оговариваемые в настоящем стандарте или рассматриваемые как
необязательные, а такжедетали иногосвойства, могущие оказатьвлияние на результаты исследований;
- полученные результаты.
8