ГОСТ Р 55293-2012
4Метод определения ферментативной активности целлюлазы с
субстратом натриевой соли карбоксимстилцеллюлозы
4.1 Сущность метода
4.1.1 Метод основан на количественном определении редуцирующих
(восстанавливающих)сахаров,образующихсяврезультатедействия
фермента целлюлазы на субстрат натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы
(КМЦ) при температуре 50 °С.
4.1.2 За единицу целлюлазной активности (1 ед.ЦлС) принимают
количествофермента,котороегидролизуетКМЦсвысвобождением
1мкмолявосстанавливающихсахаров(вглюкозномэквиваленте),
образующихся за 1 мин при стандартных условиях (температура 50 °С и
5,0 ед. pH).
4.1.3 Содержание редуцирующих сахаров, образующихся в результате
ферментативнойреакции,определяютколориметрическимметодом,
основанным на взаимодействии сахаров с реактивом Шомоди-Нельсона [2].
В результате этой реакции образуется соединение голубого или бирюзового
цвета,интенсивность окраскикоторогопропорциональнасодержанию
редуцирующихсахаров,образовавшихсявпроцессеферментативной
реакции.Интенсивность окраскиполученных растворовизмеряютна
фотоэлектроколориметре или спектрофотометре при длине световой волны
610 нм; активность выражается в единицах целлюлазной способности
(ед.ЦлС/г или ед.ЦлС/см’) анализируемого препарата.
4.2Средства измерений, вспомогательное оборудование, реакти
вы, посуда, материалы
4.2.1Дляопределенияцеллюлазнойактивностииспользуют
следующие средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы,
посуду, материалы:
Весы,обеспечивающиеточностьвзвешиванияспределами
допускаемой абсолютной погрешности ± 0,3 мг по ГОСТ Р 53228.
Фотоэлектроколориметр (КФК-3) или спектрофотометр (СФ) любого
типа, которые обеспечивают измерения при длине световой волны 610 нм с
5