ГОСТ Р 55293-2012
4.3.6 Построение градуировочного графика
В каждую из параллелей, состоящей из пяти пробирок (16 х 150 мм),
вносятпо 1 см3 рабочих градуировочных растворов глюкозы различных
концентраций в соответствии с таблицей 1, добавляют в каждую пробирку по
1 см3 реактива Шомоди, приготовленного по 4.3.2, перемешивают и
помещают пробирки в кипящую водяную баню на 20 мин.
Пробирки охлаждают в холодной воде, добавляют по 1 см3 реактива
Нельсона,приготовленногопо4.3.3,содержимоеперемешивают,
выдерживают 10 мин и вносят по 7 см3 дистиллированной воды, доводя
объем содержимого пробирки до 10 см3.
Одновременно готовят контрольную пробу на реактивы по 4.5.2.
Оптические плотности растворов глюкозы измеряют на фотоэлекгроколори-
метре или спектрофотометре при длине световой волны А= 610 нм в кюветах с
толщиной поглощающего свет слоя 10 мм в сравнении с контролем на
реактивы.
Для построения каждой точки градуировочного графика вычисляют
среднеарифметическое значение оптической плотности трех параллельных
измерений.
Пополученнымсреднеарифметическимзначениямстроят
градуировочный график зависимости оптической плотности (поглощения) от
массовой доли глюкозы (мг/см3). Рабочая зона градуировочного графика
лежит в пределах от 0,10 до 1,1 ед. оптической плотности.
На оси абсцисс А’откладывают массовую долю глюкозы С в мг/см3; на
оси ординат Y - соответствующие значения оптической плотности D при А=
610 нм. На рисунке приведен пример градуировочного графика. Величина,
обратнаятангенсуугланаклонакалибровочнойкривой,составляет,
например, 0,098 (1/tg = 0,098), что является коэффициентом К, входящим в
формулу расчета целлюлазной активности. Величина коэффициента может
меняться в зависимости от приготовленных реактивов Шомоди и Нельсона.
Таким образом, эта величина равна массовой доле глюкозы в рабочем
растворе, отложенной на оси X, при оптической плотности на оси Y, равной
,
10
.
11