ГОСТ 31708—2012
8 Подготовка проб
Подготовку проб проводят в соответствии ГОСТ 26669. Рекомендуется достижение соглашения
заинтересованных сторон по подготовке проб конкретного продукта при отсутствии соответствующе го
стандарта.
9 Проведение определения
9.1 Метод качественного определения
9.1.1 Приготовление пробы и первич>юго разведения в зависимости от вида продукта соглас
но ГОСТ 26669. [3]. [4]. [5J. [6] или [7].
Состав ЕС-6ульона с лаурилсульфатом при определенной концентрации согласно таблице 1
а) и Ь).
Добавляют 1 см3 первичного разведения к 9 см3бульона с лаурилсульфатом одинарной концен
трации (0.1 г или 0.1 см3образца) или 10 см3первоначального разведения к 10 см3 бульона с лаурил
сульфатом двойной концентрации (1 г или 1 см3 образца). Для больших объемов пробы первичное
разведение приготавливают добавлением 0,1 см3 или 0.1 г к 9 см3 разбавителя (/3]. [4] или [7]). затем
добавляют весь объем первичного разведения к 90 см3 бульона с лаурилсульфатом одинарной кон
центрации. Например, добавляют 5 см3 или 5 г образца к 45 см3разбавителя и весь объем начальной
суспензии вносят в 450 см3 бульона с лаурилсульфатом одинарной концентрации или вносят пробу в
равный объем.
9.1.2 Инкубация селективного обогатительного бульона (бульона с лаурилсульфатом)
Инокулированный бульон с лаурилсульфатом одинарной или двойной концентрации (см. 5.2) ин
кубируют в термостате (см. 6.2) при температуре 37 °С в течение (24 ± 2) ч. Если на этой стадии не
обнаруживают ни газообразования, ни замутнения среды, затрудняющего определение газообразова
ния. продолжают инкубацию до (48 ± 2) ч.
Примечание — Время инкубации проб живых моллюсков должно составлять (48 ± 2) ч.
При исследовании некоторых молочных продуктов (например, казеина) пробирки-поплавки Даре
ма могут застревать на дне пробирки с селективной обогатительной средой. Если после 48 ч инкубации
в пробирке обнаруживают лишь помутнение без газообразования, то также осуществляют пересев в
EC-бульон согласно 9.1.3.
9.1.3 Инокуляция и инкубация селективной среды (ЕС-бульона)
При обнаружении помутнения, выпадения осадка или видимого газообразования после инкуба
ции (см. 9.1.2) селективной среды двойной концентрации или при обнаружении видимого газообразо
вания после инкубации селективной среды одинарной концентрации с помощью бактериологической
петли (см. 6.5) проводят пересев в пробирку с EC-бульоном. Инокулированный EC-бульон инкубируют
на водяной бане (см. 6.3) или в термостате (см. 6.2) (24 ± 2) ч при температуре 44 °С. Если на этой
стадии не обнаруживают видимого газообразования в EC-бульоне (см. 5.3). то общее время
инкубации продлевают до (48 ± 2) ч.
Примечание — Общее время инкубации проб живых моллюсков должно составлять (24 ± 2) ч.
9.1.4 Инокуляция и инкубация пептонной воды
При обнаружении видимого газообразования после инкубации согласно 9.1.3 с помощью бактери
ологической петли (см. 6.5) производят пересев в пробирку с пептонной водой (см. 5.4). предваритель но
прогретой до температуры 44 °С. Инкубируют (48 ± 2) ч при температуре 44 °С.
9.1.5 Обнаружение образования индола
В пробирку с пептонной водой (см. 5.4) после инкубации согласно 9.1.4 добавляют 0.5 см3 реак
тива на индол (см. 5.5). После интенсивного перемешивания через 1 мин проводят оценку реакции.
Красное окрашивание в спиртовой фазе свидетельствует о наличии индола.
9.1.6 Оценка результатов
При обнаружении видимого газообразования в пробирке с EC-бульоном и образования индола в
пробирке с пептонной водой (см. 9.1.2—9.1.4) селективную обогатительную среду оценивают как по
ложительную (презумптивная Escherichia coli обнаружена).
5