ГОСТ 31708— 2012
3 Термины и определения
В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определени
ями:
3.1 презумптивная Escherichia coli (presumptive Escherichia coli): Бактерия, ферментирующая
при температуре 44 °С лактозу с образованием газа и образующая индол из триптофана при прове
дении опыта в соответствии с методом, указанным в настоящем стандарте.
3.2 количество презумптивных бакторий Escherichia coll: Наиболее вероятное число E.coli в
см3 или г образца при условии проведения опыта в соответствии с методом, указанным в настоящем
стандарте.
4 Принцип метода
4.1 Метод качественного определения
4.1.1 Определенное количество первичного разведения образца вносят в пробирку с жидкой се
лективной обогатительной средой.
4.1.2 Пробирку инкубируют до 48 ч при температуре 37 °С. Для обнаружения газообразования
пробирку проверяют через 24 и 48 ч инкубации.
4.1.3 При обнаружении затемнения, образования хлопьев или вспенивания среды проводят пере
сев в пробирку с жидкой селективной средой (ЕС-бульон).
4.1.4 После пересева согласно 4.1.3 пробирку инкубируют до 48 ч при температуре 44 °С. Для
обнаружения газообразования пробирку проверяют через 24 и 48 ч инкубации.
4.1.5 При обнаружении вспенивания среды в пробирке после инкубации согласно 4.1.4 проводят
пересев в пробирку с безиндольной пептонной водой.
4.1.6 После пересева согласно 4.1.5 пробирку инкубируют до 48 ч при температуре 44 °С. Про
бирку проверяют для обнаружения образования индола при распаде триптофана в составе пептона.
4.1.7 Пробирки с затемнением, образованием хлопьев или газообразованием в жидкой селектив
ной обогатительной среде (см. 4.1.1). при пересеве из которых в ЕС-бульон обнаружилось газообразо
вание и образование индола в пептонной воде при температуре 44 °С. расценивают как содержащие
презумптивную Escherichia coli. Результат выражается как «презумптивная Escherichia coli обнаружена»
или «презумптивная Escherichia coli не обнаружена (отсутствует)» в граммах или см3 продукта.
4.2 Метод количественного определения
4.2.1 Определенное количество первичного разведения образца вносят в три пробирки с жидкой
селективной обогатительной средой двойной концентрации.
4.2.2 Определенное количество первичного разведения образца вносят в три пробирки с жидкой
обогатительной средой одинарной концентрации. Затем в аналогичных условиях определенные коли
чества десятикратного разведения образца вносят в другие три пробирки с жидкой обогатительной
средой одинарной концентрации.
4.2.3 Пробирки со средами двойной и одинарной концентрации инкубируют до 48 ч при темпера
туре 37 °С. После 24 и 48 ч инкубации пробирки исследуют для обнаружения газообразования.
4.2.4 Из каждой пробирки со средой двойной концентрации, в которой обнаружено затемнение,
образование хлопьев или вспенивание среды, а также из каждой пробирки со средой одинарной кон
центрации. в которой обнаружено вспенивание, осуществляют пересев в пробирку с жидкой селек
тивной средой (ЕС-бульон).
4.2.5 После пересева согласно 4.2.4 пробирки инкубируют до 48 ч при температуре 44 °С. Для
обнаружения газообразования пробирки проверяют через 24 и 48 ч инкубации.
4.2.6 При обнаружении вспенивания среды в пробирках после инкубации согласно 4.2.5 проводят
пересев из них в пробирки с безиндольной пептонной водой.
4.2.7 После пересева согласно 4.2.6 пробирку инкубируют до 48 ч при температуре 44 °С. Про
бирки проверяют для обнаружения образования индола при распаде триптофана в составе пептона.
4.2.8 Наиболее вероятное число Escherichia coli рассчитывают с помощью таблицы НВЧ (прило
жение А), в зависимости от числа пробирок с селективной обогатительной средой одинарной и двойной
концентрации, при пересеве из которых в ЕС-бульон обнаружилось газообразование и образование
индола в пептонной воде при температуре 44 °С.
2