ГОСТ Р 55027—2012/lSO/TS 10272-3:2010
Типичные колонии на mCCD агаре имеют сероватый цвет, часто с металлическим блеском, они
плоские ивлажные иимеют тенденцию кразрастанию. Разрастание колоний выражено меньшенаболев
сухих поверхностях агара. Могут встречаться идругие формы колоний.
9.5Подтверждение вида Campylobacterspp.
9.5.1 Общие положения
Поскольку рассматриваемые бактерии быстро разрушаются на воздухе, необходимо незамедли
тельно следовать процедурам, описанным в9.5.2—9.5.6.
9.5.2 Отбор колонии для подтверждения
9.5.2.1 Для подтверждения с каждого слоя (9.4.3) отбирают по меньшей мере одну колонию, рас
сматриваемую вкачестветипичнойили подозрительной колонии Campylobacterspp., исследуют морфо
логию и подвижность с помощью микроскопа (9.5.3.1) и продолжают тем же способом с еще четырьмя
колониями, если перваядала отрицательный результат.
9.5.2.2 Производят посев каждой из отобранных колоний на слой колумбийского кровяного агара
(5.4.1). чтобыдать развитьсячетко изолированным колониям. Слои инкубируют вмикроаэробной атмос
фере при 41,5 "С втечение 24 ч — 48 ч. При исследовании морфологии, подвижности, микроаэробного
роста при 25 °С, аэробного роста при 41.5 еС и присутствия оксидазы используют чистые культуры.
9.5.3 Исследование морфологии и подвижности
9.5.3.1 Суспендируют одну колониюсослоя колумбийского кровяногоагара (Э.5.2.2) в 1см3бульо
на для бруцелл (5.4.2) или солевого раствора пептона и исследуют морфологию и подвижность при
помощи микроскопа (6.13).
9.5.3.2 Для дальнейшего исследования сохраняют все культуры (Э.5.2.2), в которых обнаружены
изогнутые бациллы со спиральной «штопорообразной» подвижностью (9.5.3.1).
9.5.4 Исследование роста при температуре 25 °С (микроаэробного)
Используя колонии, изолированные в 9.5.2.2. ииокулируют при помощи петли (6.11) поверхность
слоя колумбийского кровяного агара (5.4.1)).
Инкубируют слой при 25 °С вмикроаэробной атмосфере (6.14) в течение (44 ± 4) ч.
Исследуют слой с целью выявления видимого роста колоний Campylobacterspp.
9.5.5 Исследование роста при температуре 41,5 °С (аэробного)
Используя колонии, изолированные в 9.5.2.2. инокулируют при помощи петли (6.11) поверхность
слоя колумбийского кровяного агара (5.4.1).
Инкубируют слой при температуре 41,5 вС ваэробной атмосфере втечение (44 ± 4) ч.
Исследуютслой с целью выявления видимого роста колоний Campylobacterspp.
9.5.6 Обнаружение оксидазы
Используя петлю из платиново-иридиевого сплава, пластиковую петлю или стеклянную палочку
(6.11), отбирают порцию четкоизолированной колонии из каждой отдельной чашки (9.5.2.2) инаносят на
фильтровальную бумагу, смоченную реактивом для обнаружения оксидазы (5.4.3). Появление розова
то-лилового. фиолетового или темно-синего цвета в течение 10 с свидетельствует о положительной
реакции. Если используется имеющийся впродаже набор дляанализа оксидазы. необходимоследовать
инструкциям изготовителя.
Подтверждают результаты, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами
подходящих контрольных штаммов являются Pseudomonas aeruginosa NCTC 10662 (положительный
контроль) иEscherichia coliNCTC 9001 (отрицательный контроль).
9.5.7 Интерпретация
Campylobacterspp. дает результаты согласно таблице 1.
Т а б л и ц а 1 — Характеристики Campylobacter spp.
Морфология (9.5.3)
Малые искривленные бациллы
Подвижность (9.5.3)
Характерная
Микроаэробный рост при температуре 25 ‘С (9.5.4)
-
Аэробный рост при температуре 41.5 *С (9.5.5)
-
Оксидаза (9.5.6)
♦
Campylobacterspp. присутствует, если по меньшей мере одна колония демонстрирует вышеука
занные характеристики.
5